2.在设计引物时，的目的是为了表达蛋白酶。因此，根据CDS设计引物即可。我可以肯定，这样做没有问题。3.在基因工程表达中，CDS上下游的序列通常是没有用的。请检查您公司设计的引物是否从CDS的两端开始设计。如果上游引物与CDS的前22个碱基能够匹配，那么上游引物就没有问题。4.如果您将来要用HIS*6标签进行纯化表达，您需要注意下游引物扩增的目的片段是否存在终止序列。如果存在终止序列，那么在表达时HIS*6标签无法与目的基因融合表达，这意味着您无法用镍层析柱对表达的蛋白进行纯化。