卡罗莱纳箱龟是陆生龟类，喜欢水，但不能深水养。它们在野外生活在河边或池塘旁边的森林和灌木丛中，有时会涉过非常浅的溪流。卡罗莱纳箱龟是杂食性龟类，摄食小鱼、小虾等动物性饵料，以及仙人掌、芦荟、各种水果等植物性饵料。它们通常在白天休息，清晨和雨后较为活跃。冬季，它们会进入冬眠，与亚洲的黄缘闭壳龟有相似的习性。其中佛罗里达亚种偏向植食性。