引物跨环化位点是指circRNA的反向剪切位点存在高度可变性，一个引物无法同时扩增多个剪切位点产物，需要设计第二种引物。circRNA是环状RNA，具有反向剪切位点多样性，即不同的剪切位点可以产生相同的circRNA。因此，在设计引物时，需要考虑剪切位点的多样性，以避免引物出现跨环化现象，导致产物扩增不准确。