1.培养基配制：母种培养基通常包含马铃薯（去皮）20%，葡萄糖2%，琼脂2%，水1000毫升，pH值维持在5.5至6之间。准确称取原料，煮沸后定容，分装。严格控制原料比例和pH值，确保培养基适宜菌丝体生长。2.灭菌处理：灭菌采用高压蒸汽法，在121℃下维持20-30分钟。灭菌后，在无菌条件下冷却。3.无菌操作：接种前需消毒接种室或接种箱。接种时，点燃酒精灯，消毒双手，灼烧接种钩，挖取菌丝接入新试管斜面。灼烧管口后塞上胶塞。4.培养与保存：接种试管置于适宜温度下培养，直至菌丝体覆盖斜面。保持环境清洁，避免振动和污染。成熟后，采用斜面低温保存法，每隔7个月移植转管一次。5.注意事项：检查母种是否有污染。严格控制培养条件，防止温度过高、含水量过低影响菌种生长。