能。在高速公路收费站工作的人员可以申请基层就业学费补偿，根据《国家基层就业创业扶持》，在基层单位工作满一年以上的人员，可以申请基层就业学费补偿。高速公路收费站属于基层单位，因此在该单位工作满一年以上的人员可以申请该项补偿。