将药液滴加在直径8毫米的滤纸圆片上，制成具有一定剂量的药片，置于PDA平板一侧。在冰箱内存放30分钟使药剂充分扩散。将供试菌进行前培养，制成直径5毫米的菌块，并置于平板另一侧。在25±1℃条件下培养48至72小时，当分离物具有抗菌活性时，菌丝扩展受到抑制而形成抑菌带。