PBS稀释。当然最好用封闭液直接稀释，再加一点TritonX100效果好。培养液成分太多了。而且固定之后细胞都死了，用培养液没什么意义，只要保证其pH等条件适合就好了。抗体说明书上都会有推荐的稀释倍数。上网查一下，有很多protocol。一般一比几百到一万都有，依抗体而定。可以4度过夜，这样染色效果好。二抗一般较便宜，一般1：50到1：200多。扩展资料。注意事项。为进一步提高信噪比，推荐配套使用QuickBlock&#8482；免疫染色封闭液(P0260)和QuickBlock&#8482；免 疫染色一抗稀释液(P0262)用于封闭及一抗的稀释。为了能使稀释的二抗可以反复多次使用，二抗孵育结束后稀释的二抗应立即存放在4℃，以便于后续重复使用。