1、外源基因的拷贝数。2、外源基因的表达效率：启动子的强弱，核糖体接合位点的有效性，SD序列和起始密码ATG的间距，密码子组成。3、表达产物的稳定性。4、细胞代谢负荷。5、工程菌的培养条件。