一、乙脑病毒的简介

简称乙脑病毒，属于虫媒病毒黄病毒科黄病毒属。主要症状为高热、头痛、呕吐、昏睡、痉挛等。重症者可周身高烧、抽痉不止、脑水肿、呼吸或循环衰竭而死亡，部分患者留有后遗症。消灭蚊子孳生地，并扑灭越冬蚊和新生成蚊是预防乙脑的关键。猪是乙脑病毒的主要中间宿主和传染源，在乙脑流行季节前，应对猪进行预防注射，可有效地降低乙脑发病率。人体接种疫苗可提高对乙脑病毒感染的抵抗力，对预防乙脑也有良好效果。乙脑尚无特效治疗方法。早期住院、中西医结合治疗，可以大大提高治愈率，减少后遗症。

1935日本学者首先从因脑炎死亡病人的脑组织中分离到该病毒，故国际上又称日本脑炎病毒（Japanese encephalitis virus，JEV），所致疾病在日本称日本乙型脑炎（***E）。1950年以来，中国对该病进行了大量病原学和流行病学研究，为了与甲型脑炎相区别，定名为流行性乙型脑炎，简称乙脑，是中国夏秋季流行的主要传染病之一，除、、青海外，全国各地均有病例发生，年发病人数2.5万，病死率10%，大约15%的患者留有不同程度的后遗症。

二、乙脑病毒的微生物学诊断

乙脑早期快速诊断通常采集性期患者血清或脑脊液特异性lgM ，也可做RT-PCR检测标本中的病毒核酸片段，一般6个小时内可初步报告结果。常规血清学试验，（H1、CF、NT）需取双份血清，同时做对比试验，当恢复期血清抗体滴度比急性期≥ 4倍时，有辅助诊断意义，可用于临床回顾性诊断。由于乙脑患者病毒血症期短，直接检出病毒抗原或分离病毒阳性率低，较少用于诊断试验。

特异性lgM检测

乙脑病毒感染发病早期即产生特异性lgM ，病后2~3周达到高峰，故单份血清可做出早期诊断。可使用：① lgM 捕捉ELISA法（见23章）； ②2ME-NI法，血凝抑制抗体存在于lgM及lgG中，将早期单份血清分成二份，一份用2巯基乙醇（2ME）处理，以破坏lgM ，另一份不处理，然后同时做HI试验，若处理血清抗体滴度比未处理的下降≥4倍，则为lgM 阳性； ③微量间接免疫荧光法，用荧光素标记的抗u链血清，检测已与细胞抗原片结合的lgM，根据特异性荧光颗粒，判断血清标本中的lgM存在。

常规血清学试验

1.血凝抑制试验 对乙脑诊断而言，本法特异性较低，但敏感性高，简便易行。常用于病毒的初步鉴定，确定有无乙脑病毒存在。检测血清标本中的HI抗体，多采用2ME-HI法。

乙脑的临床症状与病毒相应抗体的关系

乙脑的临床症状与病毒相应抗体的关系

2.补体结合试验 补体结合抗体仅存在于lgG 中，病后出现迟，消失快，适用于诊断感染。

3.中和试验 抗体存在于lgG、 lgM中，出现早，维持久。中和试验特异性和敏感性都高，但操作繁杂，需用大量动物或组织培养管，需时较久，不适于临床诊断常规使用，而在血清学流行病学调查和病毒鉴定上有价值。

三、乙脑病毒的特异防治

特异预防

现用的乙脑灭活疫苗是用地鼠肾细胞培养增殖，甲醛灭活制成，初次免疫时，皮下注射2~3次，间隔7-10天，以后每年加强注射一次，免疫力维持半年左右，保护率达66-90%。中国已筛选出乙脑病毒减毒株，用地鼠肾细胞培养制成减毒活疫苗，只需皮下注射一次，安全有效，正作现场观察。疫苗接种对象是10岁以下儿童和来自非疫区的军民。流行区饲养的仔猪接种乙脑疫苗，以杜绝传染来源，也可使猪健康成长。

防蚊灭蚊是预防本病的有效措施。

特异治疗

乙脑治疗仍采用对症处理及支持疗法，有报道用病毒唑、干扰素、恢复期血清等治疗，可能减轻病势，但已出现脑炎症状者，则无治疗效果。中国采用淋巴细胞杂交瘤技术，制备出高中和活性乙脑单克隆抗体，经系统动物实验治疗证明安全有效，95年经卫生部批准进入 Ⅰ、Ⅱ 期临床试验，是一种特异免疫治疗制剂。

四、乙脑病毒的生物学性状

形态与结构

乙脑病毒为球形，直径40nm，内有衣壳蛋白（C）与核酸构成的核心，外披以含脂质的囊膜，表面有囊膜糖蛋白（E）刺突，即病毒血凝素，囊膜内尚有内膜蛋白（M），参与病毒的装配。病毒基因组为单股正链RNA，全长11kb，自5′至3′端依次编码结构蛋白C、M、E以及非结构蛋白NS1-NS5，病毒RNA在细胞浆内直接起mRNA作用，翻译出结构蛋白和非结构蛋白，在胞浆粗面内质网装配成熟，出芽释放。

敏感动物与细胞

乳鼠是常用的敏感动物，脑内接种乙脑病毒后3~4天发病，一周左右死亡，脑组织内含大量感染性病毒，是分离病毒、大量制备抗原的可靠方法。

BHK细胞系、C6/36细胞系及鸡胚成纤维细胞是常用的敏感细胞，病毒在细胞内增殖引起细胞圆缩、颗粒增多、细胞脱落等CPE。在培养上清中含有传染性病毒，胞浆内胞膜上可检出特异性抗原。细胞培养增殖病毒简便易行，已取代动物培养用物制备疫苗、诊断抗原，以及研究病毒复制机理、筛选抗病毒药物等。