（一）无菌技术的概念
1．无菌技术：是在医疗、护理操作中，防止一切微生物侵入人体和防止无菌物品、无菌区域被污染的操作技术。
2．无菌区：指经灭菌处理且未被污染的区域。
3．非无菌区：指未经过灭菌处理或经过灭菌处理后又被污染的区域。
4．无菌物品：指未经过物理或化学方法灭菌后保持无菌状态的物品。
5．清洁：是清除物品上的一切污秽。目的是去除和减少微生物，但并非杀灭微生物。
6．消毒：是指用物理或化学方法清除或杀灭物体上的病原微生物，（不包括细菌的芽孢），使之减少到不能引起感染或至病。
7．灭菌：是用物理或化学方法杀灭一切致病和非致病微生物，包括细菌的芽孢。
（二）无菌技术操作原则
1．无菌操作环境应清洁、宽敞，操作前半小时须停止扫地、更换床单等，减少人群流动，以免尘土飞扬。
2．无菌操作前，工作人员要戴好帽子和口罩，剪指甲、洗手。
3．无菌物品和非无菌物品必须分开放置，并有明显标志；无菌物品不能暴露于空气中，应存放在无菌包或无菌容器中，无菌包外须标明物品名称、灭菌日期，物品按失效期先后顺序摆放。
4．无菌包的有效期一般为7天，过期或潮湿应重新灭菌。
5．进行无菌操作时，应先明确无菌区和非无菌区。
6．无菌操作时，操作者身体应与无菌区保持一定距离，取用无菌物品时应使用无菌持物钳；手臂应保持在腰部或治疗台面以上，不可跨越无菌区，手不可接触无菌物品，无菌物品一经取出，虽未使用，也不可放回无菌容器内。避免面对无菌区谈笑、咳嗽、打喷嚏。用物疑有或已污染，应予重新灭菌。
7．一套无菌物品只供一位患者使用，以防止交叉感染。
（三）无菌持物钳的使用的相关知识
1．无菌持物钳是用于取用和传递无菌物品的器械，常用的有三叉钳、卵圆钳、镊子三种。
2．无菌持物钳的存放方法有两种：1）经压力蒸气灭菌后浸泡在内盛消毒液，底部垫有纱布的大口有盖容器内，容器深度与钳长比例合适，消毒液面浸摸轴节以上2-3CM或镊子长度的1/2，一个容器只放一把无菌持物钳。2）干燥保存法：将盛有无菌持物钳的无菌干罐保存在包内，集中治疗前开包，4-8h更换一次。
3．浸泡无菌持物钳的常用消毒液：2%碱性戊二醛溶液
4．无菌持物钳不能用以换药和消毒皮肤，不能触碰未经消毒的物品，不能用持物钳夹取油纱布及直接伸入药瓶内醮取药液。
5．无菌持物钳的使用要求：
1）手固定在持物钳上端的两个圆环或镊子上1/3部分。
2）保持头端向下，闭合钳端，垂直取出，钳端不可倒转向上。
3）用后闭合钳端，立即垂直放回容器，浸泡时轴节松开。
4）到远距离取物时，应将持物钳和容器一起移至操作处。
5）无菌持物钳及其浸泡容器每周清洁、消毒一次，更换消毒液，使用频率较高的应每天清洁、灭菌。
6）不可用无菌持物钳夹取油纱布，防止油粘于钳端而影响效果。
（四）戴无菌手套法的相关知识
戴脱无菌手套的要求：
1）剪短指甲，摘下手表及饰物，洗净双手并擦干。
2）应选择大小合适的手套。
3）未戴手套的手不可触及手套的外面，而戴手套的手不可触及未戴手套的手或另一手套的里面。
4）戴好后，为了使手套与手贴合，可用双手手指交叉相互推送，也可用无菌纱布推送，不可强行拉扯，以免损坏。如穿手术衣则将手套反折部分翻上套在手术衣袖口上。
5）戴好手套后，应双手对合，举手过腰部放在胸前，但不可离工作服太近。
6）使用前，应用无菌生理盐水或蒸馏水冲净手套上的滑石粉，使用过程中，如有污染或有破损，应立即更换。
7）脱手套前应冲净手套上的污迹，再自腕部翻转脱下。
8）不可戴手套撕贴胶膏。
（五）取无菌溶液的相关知识
1．无菌溶液倒出后，不可再倒回瓶中。
2．不可将无菌敷料堵塞瓶口倾倒无菌溶液。
3．不可将无菌敷料直接伸入无菌溶液内醮取，以免污染剩余的无菌溶液。
4．以开启过的未被污染的溶液可保存24h。
（六）无菌容器使用法的相关知识
1．临床为了保持灭菌物品无菌、方便随时取用，常用无菌容器盛放无菌物品。常用的无菌容器有无菌盒、罐、盘及贮槽等。
2．各种无菌容器的使用要求
（1）贮物罐、盘
①取物时，拿起容器盖平移离开容器，内面向上置于桌面上或内面向下拿在手中，拿盖时手不可触及盖的内面及边缘。
②从无菌容器内夹取无菌物品时，必须用无菌持物钳，物品取出后应立即盖严。关闭时，盖子应由后向前覆盖整个容器口。
③手持无菌容器时，应托住容器底部，手指不能触及容器边缘及内面。
（2）贮槽
从贮槽内取物时，应将盖子完全打开，以免物品触碰边缘而污染。
3．浸泡消毒器械物品时，应在容器盖上标明浸泡时间，达到灭菌时间方可使用。消毒液每周更换1——2次，容器也同时灭菌处理。
4．无消毒液的容器，应每天灭菌。
3．无菌容器打开后，记录开启的日期、时间，有效使用时间为24小时。
（七）铺无菌盘的相关知识
无菌包的使用方法及要求：
无菌包布应用双层致密、未脱脂的厚棉布制成。进行高压蒸气灭菌。
各种手术包及产包等需要用两块双层包布，一般要求外层包布的各边比内层包布宽10厘米。
无菌包以“十”字形包扎好，若包内物品未用完，按原来折痕包盖，带横向“一”字形扎好，注名开包日期及时间。
无菌物品放置应离地≥20cm，离墙≥5cm ，存放标识清楚。
①干燥环境中，无菌包的有效期为7天。
②使用前，核对无菌包的名称、灭菌日期，包是否松散、潮湿，查看化学指示胶带颜色改变情况。
③包内物品未一次用完，须按原折痕依次包好，带子横向绕捆，以示区别，并注明开包日期及时间，有效期为24小时。如包内物品已污染，则须重新灭菌。
④包内物品如一次全部取出，可将包托在手上，另一手将包布四角抓住，稳妥地将包内物品全部投入到无菌区域内。
无菌盘的准备
无菌盘是将无菌巾铺在清洁、干燥的治疗盘内，使之形成一个无菌区，放置无菌物品，以备治疗、护理之用。如换药盘、注射盘、气管切开护理盘等。折好的治疗巾用双层包布包好，经高压蒸气灭菌后备用。
（1）治疗巾的折叠法
①纵折法：将治疗巾纵折两次，再横折两次，开口边向外。
②横折法：将治疗巾横折后再纵折，再重复一次。
③三横一纵法：治疗巾横折三次，再纵折一次。
铺盘区域必须清洁干燥。
防止无菌巾受潮。
覆盖无菌巾时注意无菌巾边缘对齐。
准备好的无菌盘若不能立即使用，应注明铺盘日期、时间，无菌盘有效期为4小时。
2%戊二醛溶液消毒灭菌法
戊二醛属于灭菌剂，具有广谱、高效杀菌作用。戊二醛常用灭菌浓度为2%，2%戊二醛溶液加入0.3%碳酸氢钠，成为2%碱性戊二醛。使用过程中，经常进行浓度的监测。
适用于耐泡不耐高温的金属器械、医学仪器、内镜等，消毒需要10-30分钟，灭菌需要7-10小时。
浸泡金属类物品时，加入0.5%亚钠作为防锈剂。
灭菌后的物品，使用前用无菌蒸馏水冲洗。
戊二醛对皮肤、黏膜有刺激性，接触戊二醛溶液时应戴橡胶手套，防止皮肤吸收并防止溅入眼中，一旦溅入，立即用清水洗。
装戊二醛消毒液的容器应加盖。
清洁、消毒、灭菌的相关知识
消毒灭菌的方法有：物理消毒灭菌法（热力消毒灭菌法、光照消毒灭菌法）和化学灭菌法
压力蒸气灭菌法
1．概念：压力蒸气灭菌法是利用高压及饱和蒸汽的高热所释放的潜热灭菌。潜热是指当1g100℃水蒸气变成1g100℃的水时，释放出2255J（529cal）的热能。
2．使用范围：用于各种器械、敷料、搪瓷、橡胶、耐高温玻璃用品及溶液等灭菌。
3．分类：下排气压力蒸气灭菌和预真空压力蒸气灭菌
4．下排气压力蒸气灭菌条件是：压力102.97——137.30kpa，温度121——126℃，时间是15-20分钟。
5．预真空压力蒸气灭菌的条件：应在通入蒸气前先将内部抽成真空，形成2.0-2.67kpa的负压，以利蒸汽的穿透。压力达105.95kpa，温度达132℃，5-10分钟即可灭菌。
6．压力蒸汽灭菌效果的的监测方法：物理监测法、化学监测法和生物监测法
1）物理监测法：是用150℃或200℃的留点温度计，是用前将温度计汞柱甩至50℃以下，放入包裹内，灭菌后，检查读数是否达到灭菌温度
2）化学监测法：主要是通过化学指示剂的化学反应，灭菌后呈现的颜色变化来辨别是否达到灭菌要求。
3）生物监测法：是利用对热耐受力较强的非致病性嗜热脂肪杆菌芽孢作为指示剂，将其制成菌片，灭菌时分别放于灭菌器规定的地方，灭菌完毕后，用无菌镊取出，再放入培养基内，在56温箱中培养48小时至一周，若全部菌片无细菌生长，则表示灭菌合格。
7．压力蒸汽灭菌的注意事项：
1）灭菌包不应大于30cm×30cm×25cm，放置时各包之间留有间隙，以利于蒸汽流通和渗入包裹，以及迅速排气，保持物品干燥；
2）盛装物品的容器应有孔，必要是将容器盖打开，以利于蒸汽进入；
3）布类物品放在金属、搪瓷物品之上，防止蒸汽遇冷凝成水珠，使包布受潮而影响灭菌效果；
4）被灭菌物品应待干燥后才能取出备用；
5）随时观察压力及温度的情况。
8．常用的化学消毒剂分类：高效消毒剂、中效消毒剂、低效消毒剂。
9．常用的高效消毒剂包括：戊二醛、甲醛、环氧乙烷、过氧乙酸、碘酊、含氯消毒剂等。
10．常用的中效消毒剂：含氯消毒剂、乙醇、碘伏等。
11．常用的低效消毒剂：新洁尔灭、洗必泰等。
12．化学消毒剂的使用方法：浸泡法、擦拭法、喷雾法和熏蒸法。
13．化学消毒剂的使用原则：
1）根据物品的性能不同微生物的特性，选择合适的消毒剂；
2）严格掌握消毒剂的有效浓度、消毒时间及使用方法；
3）消毒剂应定期更换，易挥发的要加盖，并定期检测，调整浓度；
4）待消毒物品必须洗净擦干，完全浸没在消毒液内，并注意打开物品的轴节或套盖，
管腔内注满消毒液，浸泡中途如另加入物品，应重新计算时间；
5）使用前用无菌生理盐水冲净消毒后的物品，避免消毒剂刺激人体组织；
6）消毒液中不能放置纱布棉花等物，因这类物品可吸附消毒剂而降低消毒效力。
