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切片固定步骤不小心冷冻了
2024-11-23 18:04:44 责编:小OO
文档

您是想问冷冻切片的固定步骤吗。
1、恒温冰冻切片机为较理想的冰冻切片机,其基本结构是将切片机置于低温密闭室内,故切片时不受外界温度和环境影响,可连续切薄片至5-10μm。
2、切片时,低温室内温度以-15℃~-20℃为宜,温度过低组织易破碎,抗卷板的位置及角度要适当,载玻片附贴组织切片,切勿上下移动。
3、切好后,室温放置30min后,入4℃丙酮固定5-10min,烘箱干燥20min。PBS洗5min×3。
4、进行抗原热修复,微波热修复也可,室温自然冷却。可用3%H2O2孵育5-10min,消除内源性过氧化物酶的活性。

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