南京80路公交线路从富贵山(总站)出发，途径多个重要站点，最终到达福园街。首先，从富贵山(总站)出发，经过后宰门、马标、珠江路小营、浮桥、大行宫北，然后抵达南京图书馆，接着是大行宫南站。之后，公交线路继续前进，经过杨公井(八一医院)，到达太平南路常府街，随后是小火瓦巷、内桥。继续前行，到达张府园(西)，再经过建邺路和建邺路止马营，最终抵达虎踞南路水西门。随后，公交线路转向凤台路水西门，接着经过集庆门大桥西，到达南湖集贸市场东升村(省第二中医院)。
在南湖集贸市场东升村(省第二中医院)后，公交线路继续前行，经过集庆门大街湖西街、白鹭花园，然后前往集庆门大街江东中路。之后，线路继续向南，经过福园街。这条线路的反方向从福园街出发，途经云锦路、白鹭花园，然后到达集庆门大街湖西街、东升村(省第二中医院)。接着，公交线路经过南湖集贸市场、彩虹苑，最终回到集庆门大桥西。之后，线路继续前进，经过凤台路水西门、虎踞南路水西门，然后到达建邺路止马营和建邺路。随后，经过张府园(西)，内桥，羊皮巷，淮海路东，到达杨公井(八一医院)，继续前行到大行宫南南京图书馆，大行宫北，浮桥，珠江路小营，马标，最后回到富贵山(总站)。
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