台盼蓝拒染法是鉴定细胞活力的实验方法。活细胞能有效阻止台盼蓝进入,而死细胞或损伤细胞则会着色。实验中需注意以下步骤:
1. 制备单细胞悬液并稀释至每毫升含10^6个细胞。
2. 将细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1比例混合,确保混合均匀。
3. 染色后三分钟内完成计数。使用血细胞计数板分别计数活细胞和死细胞。
4. 计算活细胞率:活细胞总数 / (活细胞总数 + 死细胞总数) × 100%。
5. 染色时间不宜过长,以防活细胞被染色。
6. 台盼蓝母液制备:4克台盼蓝加少量蒸馏水研磨,再加双蒸水至100毫升,过滤。母液4°C保存,使用时用PBS稀释至0.4%。
遵循这些步骤和注意事项,可确保实验准确性和细胞活力评估。详情
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