马尾斗鱼的性别辨别主要依靠鳍的长度和腹部的变化。公鱼的鳍更为飘逸和延长，而母鱼的鳍则较短小。
在母鱼成熟之后，其腹部的生殖孔会有一个明显的突出白点，尽管公鱼也有类似特征，但母鱼的白点更为明显。此外，只有母鱼在繁殖季节会抱卵，这是识别母鱼的重要标志。
需要注意的是，区分公鱼吃饱后和母鱼抱卵时的腹部变化。公鱼吃饱后腹部会鼓起，而母鱼抱卵时腹部会向尾巴方向延伸，形成三角形。
在公母配对或母鱼发情期间，母鱼会出现竖纹，称为婚宴纹，这是其发情的显著标志。
值得一提的是，马尾斗鱼是一种展示斗鱼，不适合用于斗斗。被打掉的尾巴很难恢复，且无法恢复到原来的模样。如果公鱼进行斗斗，落败的鱼会显得沮丧和萎靡，见到胜利者则会迅速逃离。
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