在实验室中，菌种的传代保藏过程需要细致规划，以确保菌种的稳定性和有效性。首先，根据菌种说明书的要求，复溶菌粉并转种至增菌培养基中，待复壮后再转接到平板上。在适当的温度下培养，分离出单个纯种菌落，这被称为第二代菌种（G2）。之后，完成菌种鉴定，从纯菌落中制备浓菌悬液用于甘油冷冻管的制备，同时选取纯菌落制备斜面作为工作用菌种。此时，保藏菌种为第二代，而工作用菌种则为第三代。
将第二代菌种管冷冻保存，而工作用菌种则需在适当温度下培养一段时间，以便用于后续试验。取一支冷冻保存的G2代菌种转种到平板和斜面上，平板上的菌种制成冷冻保藏管，这被标记为第三代（G3），而斜面上的菌种则继续用作工作用菌种（W3）。将第三代菌种冷冻保存，同时对G2菌种进行灭菌处理后丢弃。
当工作用菌种代数小于5时，可以直接用上一代工作用菌种转接下一代工作用菌种。例如，W3可以直接转接到W4。按照上述方法操作，直到G4转为W5，此时需要重新开启安瓿，再次重复上述操作程序、保藏和使用菌种。
在上述过程中，菌种被分为两类：传代用菌种和工作用菌种。传代用菌种用于甘油冷冻管法保藏，而工作用菌种则用斜面低温保藏法保藏。实验证明，甘油冷冻管法的保存期限至少为两年，这种方法适用于细菌（需氧）和酵母菌的传代、保藏，对于厌氧菌、真菌和芽孢类细菌则需采用其他方法。
因此，采用合适的菌种保藏方法对实验的成功至关重要。通过合理的菌种传代和保藏流程，可以确保实验过程中菌种的稳定性和有效性，从而提高实验结果的可靠性和可重复性。
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