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无缝克隆如何反向设计引物
2024-10-03 03:29:17 责编:小OO
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无缝克隆反向设计引物方法如下：
1、线性化目的载体：用酶切或是PCR方式；
2、PCR获取目的片段。设计的引物5’端需要和线性化载体末端有15~25bp的重叠；
3、按照一定比例把二者混合在HB-infusion（无缝克隆试剂盒）的2×预混液内，50℃反应20min后直接转化Ecoli即可。

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