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两个内参基因怎么计算
2024-09-29 23:39:55 责编:小OO
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两个内参基因的计算步骤如下:
1、获取实验数据(实时荧光定量PCR的荧光曲线数据),包括每个样品中两个内参基因(GAPDH和beta-actin)和相应的分析基因的荧光曲线数据。
2、对每个内参基因和分析基因的荧光曲线数据进行Ct值计算,即通过荧光曲线的阈值来确定每个基因的荧光信号阈值周期数。
3、确定每个内参基因的相对表达量,通过ΔCt方法(即分析基因Ct值减去内参基因Ct值)计算每个内参基因的相对表达量。
4、计算两个内参基因的平均相对表达量,即将每个内参基因的相对表达量相加并除以2。
5、使用内参基因的平均相对表达量作为标准化因子,根据每个分析基因的ΔCt值计算其相对表达量。

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