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CTAB缓冲液怎样配制?????
2024-10-24 19:53:31 责编:小OO
文档


Tris-HCl (pH8.0)提供一个缓冲环境,防止核酸被破坏。

EDTA螯合Mg2+或Mn2+离子,抑制DNase活性。

NaCl 提供一个高盐环境,使DNP充分溶解,存在于液相中。

Cβ-巯基乙醇是抗氧化剂,有效地防止酚氧化成醌,避免褐变,使酚容易去除基因组DNA。CTAB 4g
NaCl 16.3 g。

1M Tris-HCl 20ml( PH8.0)。。

0.5M EDTA 8ml,先用70ml ddH2O溶解, 再定容至200ml灭菌。

冷却后0.2-1% 2-巯基乙醇(400ul)氯仿-异戊醇(24:1):先加96ml氯仿,再加4ml异戊醇,摇匀即可。

扩展资料:

适当的加一下热,比如50度或者60度,可以快速溶解,般这个温度对试剂的品质没有什么影响如果不是浓度太高的话。

如果浓度太高,可能冷却后又会沉淀析出来。

在高离子强度的溶液中(>0.7mol/L NaCl) CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物而不沉淀核酸。通过有机溶剂抽提,去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。

2×CTAB提取缓冲液成分:2%(w/v)CTAB,100mM Tris (pH 8.0),20mM EDTA,1.4 MNaCl,,0.2%(v/v) 还原剂(随用随加) 。

参考资料来源:百度百科——十六烷基三甲基溴化铵

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