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凯氏定氮法与分光光度法的优缺点
2024-10-25 03:04:13 责编:小OO
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凯氏定氮法的优点:可用于所有食品的蛋白质分析中;操作相对比较简单;实验费用较低;结果准确,是一种测定蛋白质的经典方法;用改进方法(微量凯氏定氮法)可测定样品中微量的蛋白质。

缺点:最终测定的是总有机氮,而不只是蛋白质氮;实验时间太长(至少需要2h才能完成);精度差,精度低于双缩脲法;所用试剂有腐蚀性。 

分光光度法的优点:灵敏度高;仪器设备简单,操作简便、快速;应用广泛。

缺点是:准确度相对不高;有的检测不可用,有性。

蛋白质与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,并换算成蛋白质含量。

扩展资料:

在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸滴定,就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是经典的蛋白质定量方法。

物质与光作用,具有选择吸收的特性。有色物质的颜色是该物质与光作用产生的。即有色溶液所呈现的颜色是由于溶液中的物质对光的选择性吸收所致。

由于不同的物质其分子结构不同,对不同波长光的吸收能力也不同,因此具有特征结构的结构集团,存在选择吸收特性的最大实收波长,形成最大吸收峰,而产生特有的吸收光谱。

参考资料来源:百度百科——凯氏定氮法

参考资料来源:百度百科——分光光度法

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