一、实验目的
1．了解紫外分光光度计的基本结构。
2．学会正确使用和维护紫外分光光度计。
3．掌握紫外分光光度计的比色皿配套方法
4.学会磺基水杨酸吸收曲线的绘制和用标准曲线法测定其含量.
二、实验原理
磺基水杨酸为白色结晶或结晶性粉末，对光敏感，高温时分解成酚和水杨酸，遇微量铁时即变粉红色，易溶于水和乙醇，溶于乙醚。磺基水杨酸用途广泛：用于医药中间体，如生产强力霉素；染料工业，用于制造表面活性剂的中间体；有机合成工业，用于制造表面活性剂；润滑酯工业，用于添加剂；用作生化试剂、分析试剂及络合指示剂，如比色分析测定高铁离子等。磺基水杨酸对紫外光有特征吸收因此可根据朗伯-比尔定律，采用标准曲线法测定其含量。
本实验首先通过绘制磺基水杨酸的吸收曲线，确定其最大吸收波长max，进而采用标准曲线法测定待测组分的含量。
磺基水杨酸的分子结构
三、仪器
紫外分光光度计、1cm石英比色皿、50ml具塞比色管、吸量管、移液管
四、试剂
1、磺基水杨酸贮备液（2.000g/L）：在分析天平上准确称取维生素2g，用蒸馏水定容至1000mL，混匀，即为2.000g/L的贮备液。（实验室已准备好）
2、磺基水杨酸标准使用液（200mg/L）：准确移取贮备液10.00ml于100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。此溶液中磺基水杨酸的质量浓度为200mg/L。（学生配制）
五、测定步骤：
1、磺基水杨酸吸收曲线的测定：
取适量使用液，以水为参比，用1cm比色皿，在220-400nm，每隔5-10nm测定吸光度，绘制吸光度—波长曲线，选择测量波长(λmax)。
2、磺基水杨酸标准曲线的绘制：
（1）分别移取磺基水杨酸的标准使用液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml于7支50ml比色管中，定容至刻度，摇匀。
（2）以纯水为参比，在λmax处测定标准系列磺基水杨酸溶液的吸光度。
（3）以磺基水杨酸的质量（µg）为横坐标、以校正后的吸光度A为纵坐标绘制标准曲线。
3、试样中磺基水杨酸含量测定：
移取待测水样溶液5.00ml于50ml比色管中，按绘制标准曲线的操作，测得水样的吸光度A，由标准曲线查得相应的磺基水杨酸含量，计算出试样的磺基水杨酸的质量浓度。做平行样。
4、数据记录：
紫外光度计型号： 吸收波长λmax： 比色皿类型：
比色皿校正值：
| 比色管编号 | 磺基水杨酸标准使用液（200mg/L） | 水样 | |||||||
| 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | |
| 移取的 体积，mL | 0.00 | 1.00 | 2.00 | 4.00 | 6.00 | 8.00 | 10.00 | 5.00 | 5.00 |
| 50mL溶液含磺基水杨酸量，μg | |||||||||
| 吸光度 | |||||||||
| 校正值 | |||||||||
| 校正后吸光度 | |||||||||
以测得的标准系列的吸光度为纵坐标，相对应的50mL溶液磺基水杨酸含量（μg）为横坐标绘制工作曲线。
水样中磺基水杨酸含量x以mg/L表示，按下式计算：
式中：m——工作曲线上查得的以μg表示的磺基水杨酸含量；
V——移取水样的体积，mL。
| 测定次数 | 1 | 2 |
| 水样中磺基水杨酸含量，mg/L | ||
| 测定结果（算术平均值），mg/L | ||
| 平行测定结果的相对平均偏差% | ||
