《饲料分析检验学》学习方法

掌握饲料理化检验的基本概念（名词解释）

 饲料分析检验的基本程序

感官检验的基本方法

饲料分析主要检验方法种类及其优缺点

主要检验方法的适用范围、原理、基本操作过程及特别需注意的问题

各类饲料品质检验指标有哪些

饲 料：能够提供动物所需养分、保证健康、促进生产，并在合理使用下不发生有害作用的可饲物质。（国家标准定义）

在一定的时间、一定的技术条件下，为满足某动物营养需要，通过有目的的劳动而创造出来的物化成果。包括能直接饲喂的全价饲料和各种半成品（浓缩饲料、添加剂预混料、精料补充料）。（饲料行业协会定义）

饲料质量：饲料原料和饲料加工后的优劣程度。

饲  料 变 异：饲料因饲料原料、饲料加工技术的差异，在饲料加工过程使用不良原料掺假 以及由于储存运输不当而损坏和变质造成的质量变化。

饲料分析及质量检测

运用实验手段，分析、测定饲料原料及产品的质量特性，然后把测定的结果与规定的质量标准相比较，以判断饲料的营养价值或对产品质量做出合格或不合格的判断。 

总体―――具有完全一致的属性的待测样品的总数

检样――由分析的整批物料的各个部分采集的少量物料。

原始样品――从生产现场等总体分析检样采取许多份检样综合在一起的样品。

平均样品――原始样品经过技术处理以后，再抽取其中一部分供分析检验用的样品。

随机采样____按照随机抽取的原则，从分析的整批物料中抽取一部分样品的方法。                 “五分法”

代表性采样____按照样品随空间(位置)和时间变化的规律（系统抽样法），采集样品，使采集到的样品能代表其相应部分的组成和质量。

样品的制备——指对样品的粉碎、混匀、缩分等过程。

新鲜样本：含有70％－90％的水分的饲料样本（大量游离水和少量吸附水）

半干样本：除去初水分的样本

风干样本：饲料样本中不含游离水，仅含有15％以下的吸附水的饲料样本。

绝干样品（absolute-dried sample）：在100~105℃烘至恒重的饲料样品。

系统误差——是由固定的原因造成的，在测定过程中按一定的规律反复出现，有一定的方向性。

这种误差大小可测，又称“可测误差”。方法误差、仪器误差、试剂误差、操作误差

偶然误差——由一些偶然的外因引起，原因往往不固定、未知、且大小不一，不可测，这类误差往往一时难于觉察

饲料的化学性污染（chemical pollution）是指各种化学物质如有害金属、化学农药、药物、化肥、合成洗涤剂、饲料添加剂、饲料添加剂及其它有毒有害的化合物对饲料的污染。

饲料养分

存在于任何饲料中能够维持动物生命和生产产品的化学成分。饲料养分可概括水分、蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素、矿物质 六大类。

饲料概略养分分析）

用化学分析法测定饲料中水分、干物质、粗灰分、粗脂肪、粗蛋白、粗纤维和差值法计算无氮浸出物含量的方法。 

饲料质量感官鉴别__以人的感觉为依据，用科学试验和统计方法来评价饲料质量的一种检验方法

饲料显微镜检测原理

以动植物形态学、组织细胞学为基础，依据各种饲料原料的特性，将显微镜下饲料的形态特征、物化特点、物理形状与实际使用饲料原料应有的特征进行对比分析的一种鉴别方法。

水分活度 （ water activity）

表示水与各种非水成分缔合的强度。

    Aw＝ƒ／ƒo ≈  p/p0 

恒重

试样在烘干或灼烧最后两次重量之差不超过规定的克数，一般小于0.2mg~2.0mg 。   

粗蛋白

饲料中蛋白质与氨基酸、酰胺、盐、铵盐等氨化物的含氮物质总称。

粗脂肪

用有机溶剂（主要是乙醚）加热提取干燥试样的可溶性物质，因其除脂肪外还含有部分有机酸、蜡质、色素、类脂质和部分脂溶性维生素，所以称为粗脂肪

促灰分－饲料经灼烧后所残留的氧化物、盐类等矿物质及泥沙等杂质

水溶性灰分——反映可溶性K、Na、Ca、Mg 等的氧化物和盐类的含量。

酸溶性灰分——反映Fe、Al等氧化物、碱土金属的碱式磷酸盐的含量。

酸不溶性灰分——反映污染的泥沙及机械物和饲料中原来存在的微量SiO2的含量

粗纤维：粗纤维是植物细胞壁的主要组成成分，包括纤维素、半纤维素、木质素及角质等成分。常规饲料分析方法测定的粗纤维是指饲料有机物中不溶于稀酸、稀碱、乙醇、乙醚的无灰残留物的总称。

１．饲料分析检验的基本程序：

检验采样       饲料感官检验         样品处理 （样品制备）

实验室

测定分析

动物性饲料质量检验          动物性饲料卫生安全监测

（营养成分分析）               （有害物质检测） 

数据处理（数据转换）         理化检验报告 

２．采样——根据一定原则，从待测样品中抽取一部分来代表整体供检验的过程。

３．采样的原则

第一 采集的样品有代表性

第二 采样过程中要设法保持原有的理化指标，防止成分逸散或带入杂质。

采样过程：（步骤）

采取检样        形成原始样品       得到平均样品        填写采样记录

4．采样方法

            一般有两种：随机采样、代表性采样

５．采样的数量

采集的数量应考虑分析项目的要求、分析方法的要求和被分析物均匀程度三个因素。

一般平均样品的数量不少于全部检验项目要求的样品量的四倍。

采集的数量应能反映该饲料的卫生质量和满足检验项目对样品量的需要，一般得到平均样品后，一式三份，供检验、复验、备查或仲裁，一般每份不少于0.5kg。

６． 采样记录内容

样本名称、采样地点和采集部位、生产厂家和出厂日期、样品批号、采样数量、包装情况、采样条件、检验项目及采样单位和采样人的姓名。

７．样品预处理的目的

1.使样品中被测成分转化为便于测定的状态；

2.消除共存成分在测定过程中的影响和干扰；

3.样品净化和浓缩富集被测成分。

８．动物性饲料理化检验学常用的检验方法

（一）感官鉴定  —－最简单、成本最低的分析方法。                        

（二）化学分析方法――常规分析中大量使用的分析方法。

（三）仪器分析方法

―――以物质的物理或化学性质为基础，利用较特殊的光电仪器来测定物质含量。

                               酸碱滴定法

容量分析     氧化还原滴定法

   化学分析方法                沉淀滴定法

                               络合滴定法

重量分析

比色法

紫外可见吸收光谱

                                            荧光光谱法

                                        原子吸收光谱法

                                          原子发射光谱

光谱法               红外光谱法

质谱法     气相色谱－质谱

仪器分析方法                                              液相色谱－质谱

核磁共振法

         高效液相色谱

色谱法   气相色谱

８．控制和消除误差的方法

1.正确选取样品量

2.增加平行测定次数，减少偶然误差

3.对照试验

4.空白试验

5.校正仪器和标定溶液

6.严格遵守操作规程

9．饲料概略营养成分分析的主要项目有

水分 （moisture content ）干物质（dry matter）粗灰分（（crude ash content）

粗脂肪（crude fat ）粗蛋白（crude Protein）粗纤维（crude fiber）无氮浸出物(no-nitrogen extractum) 

纯养分分析

氨基酸(amino acids)真蛋白(true proteinum）维生素(Vitamin)

矿物元素  微量元素 （trace element） 常量元素（mineral element）

还原糖 （reducing sugar，RS)

１０．饲料中有毒有害污染物来源

（1）饲料中天然存在的毒素：亚盐、游离棉酚、异硫氰酸酯和噁唑烷硫酮

（2）饲料外源性污染

饲料中化学污染的有毒有害物质：如重金属、农药、药物、化肥、合成洗涤剂、违禁饲料添加剂；饲料中生物性污染：霉菌、黄曲霉毒素、病原微生物

饲料化学性污染（chemical pollution）  

  各种化学物质如有害金属、农药、药物、化肥、合成洗涤剂、饲料添加剂、及其他有毒有害的化合物在饲料原料种植、饲料加工、储存、运输、销售等环节中对饲料的污染。

生物性污染：饲料受到霉菌、有害微生物及其毒素、寄生虫所造成的污染。

１１．饲料质量特性

1.可饲用特性

2.营养特性

3.感官特性

4.结构特性 

5.卫生特性

6.安全特性

１２．饲料质量指标

感官指标（sensory index）:对饲料原料或成品的色泽、气味、外观性状等所作的规定。

营养指标（nutritive index）:对饲料原料和成品的营养成分含量或营养价值所作的规定。

加工质量指标（process quality index）:对饲料原料或饲料产品粒度、混合均匀度、糊化度等所作的规定。

卫生标准（sanitation standard）饲料中对天然、次生、外源性污染有毒、有害物质及病原微生物的安全限量规定。

１３．饲料变异的影响因素

1. 自然变异：饲料原料的质量因产地、年份、采样、品种、土壤肥力、气候、收割时成熟程度不同而产生变化。

2. 加工技术的差异 

3. 掺假 ：在优质饲料原料里以一种或多种可能有或者可能没有营养价值的廉价细粒物料进行故意的掺杂。 

4. 损坏和变质

１４．饲料质量检验分析内容

1.饲料的营养素含量：概略分析和纯养分 

2.饲料添加剂的成分、含量：营养性和非营养性 

3.饲料中有毒、有害成分：

 饲料天然存在和外来空气、水源、生产等污染 

4.饲料的物理性状的监控及分析： 

5.饲料的生物学检验：动物源性物质和微生物 

Weende饲料分析体系

1．水分在饲料中的存在形式

2．挥发物质

3．糖类、脂肪含量

4．饲料中的化学物质在100℃以上是否会产生化学变化

18． 常压干燥法测定饲料水分或干物质的样品条件

1）水分是惟一的挥发物质。

（2）水分的排除情况很完全。

（3）饲料中其它组分在加热过程中由于化学反应引起的重量变化可忽略不计。

19．加热干燥法测定水分原理

饲料试样置105±2℃烘箱内，在常压下由于饲料水蒸气压力提高，相对降低周围气体介质的水蒸气压力，使饲料中水分蒸发逸出； 待全部水分蒸发（恒重），测定烘干前后的样品重量，损失的重量为样品水分含量。

20．测定蛋白质的方法分为两大类

一类是利用蛋白质的共性，即含氮量 、肽键和折射率测定蛋白质含量 ； 另一类是利用蛋白质中特定氨基酸残基、酸性和碱性基团以及芳香基团等测定蛋白质含量。

21．蛋白质测定方法主要有：

凯氏定氮法（常量法、半微量法）

双缩脲法

福林酚试剂法

紫外分光光度法

染色法

茚三酮法

红外光谱分析法

杜马斯法

BCA法（4-4`－二羧基2,2`联喹林法

22．凯氏定氮法测定基础

由于蛋白质是饲料含氮物质的主要形式，而饲料营养成分蛋白质以外的主要成分不含氮元素，所以饲料中蛋白质的定量，一般基于蛋白质含有一定比例的氮

一般先测定饲料中的总氮量，再乘一定的系数，作为饲料中蛋白质含量。

    蛋白质含量(%) =  % N×6.25

  蛋白质含量(%) =  % N/0.16 

23．常量凯氏定氮法测定原理

         样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出，而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。然后加碱蒸馏，使氨蒸出。

①　用硼酸（H3BO3）吸收后再以标准盐酸（HCl）溶液滴定。根据标准酸消耗量可以计算出蛋白质的含量。

②　也可以用过量的标准硫酸（H2SO4）或标准盐酸（HCl）溶液吸收后再以标准NaOH滴定过量的酸。

24微量凯氏定氮法

●饲料经加硫酸消化使蛋白质分解，其中氮与硫酸化合成硫酸铵。然后加碱蒸馏使氨游离，用硼酸液吸收后，再用盐酸或硫酸滴定，根据盐酸消耗量，再乘以一定的数值即为蛋白含量.

25．消化过程可能出现的现象和注意事项

分解后冷却，消化液呈完全固化状态硫酸量不足。

硫酸和盐类的添加量：有机物分解需要的硫酸量，因有机物的种类而不同，如果试样含脂量多，则需要增加硫酸量。为了提高分解温度，要大量添加盐类，但添加硫酸钾10g以上，分解结束后残留的硫酸如果不到9ml以上，则氨的回收率会降低。

催化剂：硫酸铜属于弱催化剂。

其它催化剂：汞、氧化汞、硒、硒化合物、硫酸铜以及以上物质组合的混合物。

热源强度：分解时热源的强度同迅速分解和完全氨化关系很大。

26双缩脲法测定原理

在碱性条件下，铜离子和多肽生成的复合物呈紫红色，吸收波长为540nm，比色所得的吸光度值和样品中蛋白质含量成正比。

27。索氏脂肪抽提法（乙醚提取法）

在索氏脂肪抽提器中，用有机溶剂（主要是乙醚）加热提取干燥试样的可溶性物质，蒸发去除乙醚，干燥后的剩余物重量为脂肪含量。

28测定实验过程的注意事项

乙醚回收后，烧瓶中稍残留乙醚，放入烘箱中有发生爆炸的危险，故需在水浴上彻底挥净，另外，使用乙醚时应注意室内通风换气。仪器周围不要有明火，以防空气中有机溶剂蒸气着火或爆炸。      

 提取后烧瓶烘干称量过程中，反复加热会因脂类氧化而增量，故在恒量中若质量增加时，应以增量前的质量做为恒量。为避免脂肪氧化找成的误差，对富含脂肪的饲料，应在真空干燥箱中干燥。

29．巴布科克法

在乳脂计中，用硫酸使保护脂肪球的脂肪球膜分散，游离的脂肪离心分离，加热水使脂肪上浮到巴布科克乳脂瓶刻度部分，读取脂肪层的数值，以容量法定量测定，结果用重量法表示。

30饲料中的灰分测定方法

1.干法灰化法

2.湿法灰化

3.低温等离子灰化

31．干法灰化法测定原理

样品在500℃~600℃的高温炉中，水分和挥发性成分蒸发，在有氧条件下，有机物被灼烧成二氧化碳和氮的氧化物，大部分的矿物质转化成氧化物、硫酸盐、磷酸盐、氯化物和硅酸盐。

32为什么要进行预炭化？

（1）防止在灼烧时，因温度高 

    试样中的水分急剧蒸发使试样飞扬；

（2）防止糖、蛋白质、淀粉等易发泡膨胀的  

  物质在高温下发泡膨胀而溢出坩埚；

（3）不经炭化而直接灰化，碳粒易被包住，灰化不完全。

33．粗纤维测定原理

用浓度准确的酸和碱，在特定条件下消煮样品，再用乙醚、乙醇除去醚溶物，经高温灼烧扣除矿物质的量，所余量为粗纤维。其中以纤维素为主，还有少量半纤维素和木质素。

粗纤维测定出的不是一个确切的化学实体

该方法是在公认强制 规定的条件下，测出的概略养分。

34，饲料样品预处理方法

分解（干法灰化、湿法消化）、分离、掩蔽、浓缩

35高锰酸钾滴定法测定饲料中钙含量

将试样中有机物加酸分解，使钙变成溶于水的离子状态，调整酸碱浓度，加草酸铵，使形成草酸钙沉淀，分离，再酸溶后用高锰酸钾标准溶液滴定游离的草酸根例子根据高锰酸钾标准溶液的用量，计算出试样中钙含量。

36乙二胺四乙酸钠(EDTA)络合滴定法（快速测定法）

☐将饲料试样中有机物破坏，试样中的钙变成溶于水的离子，用三乙醇胺、乙二胺、盐酸羟胺和淀粉溶液消除干扰离子的影响，在碱性溶液中以钙黄氯素为指示剂，用乙二胺四乙酸二钠标准溶液络合滴定，根据EDTA的用量计算试样中钙含量。

37饲料中总磷含量的测定--分光光度法

将试样中有机物加酸分解，使磷游离变成离子状态，在酸性溶液中，用钒钼酸铵处理，使生成黄色磷-矾-钼酸复合体[(NH4)3PO4·NH4VO3·16MoO3]，在波长420nm下进行比色测定。此法测得为总磷量，包括动物难以吸收的植酸磷。

38气相色谱法 

工作原理：

     在以适当的固定相做成的柱管内，利用气体（载气）作为移动相，使试样在气体状态下展开，在色谱柱内分离后，各种成分先后进入检测器，用记录仪记录色谱谱图。

适用范围

含挥发性或经裂解、衍生化等能气化的物质及多组分混合物的定性、定量分析。

脂肪酸

维生素 

39高效液相色谱（ HPLC）

工作原理：用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相，压入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器，色谱信号由记录仪或积分仪记录。

适用于挥发性低、热稳定性差、分子量大的高分子化合物以及离子型化合物等的定性、定量分析。

40饲料中水溶性氯化物的测定方法

硫氰酸盐反滴定法（GB39-86）（仲裁法）

原理：取适量前处理后的饲料样液，在酸性条件下，加过量标准银使氯化物生成氯化银沉淀，以铁明矾为指示剂，再用硫氰酸铵标准溶液滴定过量的银，待反应完全后，过量一滴的硫氰酸铵标准溶液便与Fe3+反应，生成红色的FeSCN2+络合物指示滴定终点即可求出饲料中含氯量。

41测定饲料热能的目的

饲料热能——饲料燃烧热（饲料在燃烧过程中，完全氧化成最终的尾产物（CO2,H2O及其他气体）所释放的热量。）

评定饲料能量价值

研究动物能量代谢的基本方法

42，氧弹测热法饲料热能测定原理

⏹将一定重量的样品压成饼状，置于密封的氧弹中，在充足的氧气条件下，令试样完全燃烧，燃烧所放出的热量被氧弹及周围的一定量的水（内筒水）吸收，水的温升与试样燃烧释放的热量成正比。由贝克曼温度计上读出水温上升的度数，该度数乘以热量计体系和水的热容量之和，即可求出样品的燃烧热。 

43饲料中氟的测定----氟离子选择电极法

☐总离子强度缓冲溶液的作用：消除干扰离子及酸度的影响　 

44尿素酶活性的定性检验方法

•酚红法：大豆制品中的尿素酶，在室温下可将尿素水解产生氨，酚红指示剂在Ph6.4~8.2时由黄变红，释放的氨可使酚红指示剂变红，根据变红时间长短来判断尿素酶活性的大小。

•

•PH增值法：脲酶活性：在规定的操作条件下，使试样中的脲酶分解尿素释放出氨基氮，以溶液pH值的变量表示。

•原理：将研细的大豆试样与缓冲尿素溶液混合，在30℃作用30min后，测定溶液的pH值。

思考题：

1.饲料分析检验的基本程序

2.饲料采样的原则是什么？ 

3.饲料采样的方法有哪些？

4.饲料采样的数量有什么规定？

5.饲料采样记录内容有哪些？

6.饲料样品保存的目的是什么?

7.什么是饲料样品制备？

8.饲料样品预处理的目的是什么？

9.饲料样品预处理的方法主要有哪些？

10.什么是实验室的分析质量？

11.实验室的分析检验误差的来源 

12.控制和消除实验室的分析检验误差的方法

13.常量凯氏定氮法测定原理

14.微量凯氏定氮法测定原理

15.测定蛋白质的方法可分为那两大类？

16.简述微量凯氏定氮法测定饲料粗蛋白的操作步骤

17.各种蛋白质测定方法的适用范围和优缺点

18.饲料粗脂肪含量测定方法有哪些？

19.索式脂肪抽提法测定饲料粗脂肪含量的原理、适用范围和特点

20.乳脂测定主要有那三种？

饲料中的灰分测定的意义

21.饲料中的粗灰分测定方法主要有哪些？

22.干法灰化法测定饲料中粗灰分的测定原理和适用范围。

23.灰化的温度过高或过低对饲料粗灰分的测定有什么影响？

24.干法灰化法测定饲料中粗灰分时为什么要进行预炭化？

25.干法灰化法测定饲料中粗灰分实验过程中加速灰化的方法主要有哪些？

26.简述高锰酸钾滴定法测定饲料中钙含量的测定原理。

27.简述比色法（分光光度法）测定饲料中总磷含量的测定原理。

28.饲料中矿物元素测定方法有哪些？其原理和适用范围如何？

29.简述饲料中水溶性氯化物含量的方法及其测定方法原理。 

30.简述酸碱法测定饲料粗纤维测定方法原理及其优缺点。

31.饲料中粗纤维是在什么公认的规定条件下测定的？如果这些规定条件有变动，则所测定结果是否能作为粗纤维含量？试说明原因？

32.无氮浸出物包括哪些成分？如何计算其含量？

33.简述饲料中热能测定方法及所用仪器和测定原理。

34.简述饲料显微镜检验的原理

35.饲料显微镜检测饲料有哪两种方法？ 

36.简述饲料感官检测的基本方法。

37.何谓饲料化学性污染     

38.何谓饲料生物性污染

39.饲料中天然有毒有害物质主要有哪几类？

40.检测棉酚的方法主要有哪几种？

41.分光光度法测定饲料中游离棉酚有哪几种？简述苯胺法测定原理

42.饲料中砷、汞、铅、镉的检测方法

43.气相色谱法测定饲料中农药残留量的程序

44.饲料中盐酸克伦特罗残留量的检测方法

45.饲料中产生黄曲霉毒素的原因

44饲料中黄曲霉毒素的检测方法下载本文