实验一　显微镜油镜的使用及微生物基本实验技术

一、实验目的

1. 复习显微镜低倍镜和高倍镜的使用技术。

2. 了解油浸系物镜的基本原理，掌握油浸系物镜的使用方法。

3. 掌握微生物实验的操作技能。

二、实验内容：

1．学习油浸系物镜的使用方法。

2．用油镜观察细菌和酵母菌染色装片。

3. 学习微生物实验的操作技能。

三、实验材料和用具

细菌三型、酵母菌染色装片；显微镜、香柏油、擦镜液、擦镜纸；试管、培养皿、移液管、纱布、棉花等。

四、操作步骤

（一）显微镜油浸的使用

1．将显微镜置于平稳的实验台上，镜座距实验台边沿约为4cm，坐正。

2．调节光源：将低倍物镜转到工作位置，把光圈完全打开，聚光器升至与载物台相距约1mm左右。转动反光镜采集光源，光线较强的天然光源宜用平面镜，光线较弱的天然光源或人工光源宜用凹面镜，对光至视野内均匀明亮为止。观察染色装片时，光线宜强；观察末染色装片时，光线不宜太强。

3. 低倍镜观察染色装片

首先下降镜台，将酵母菌染色装片置于载物台上，用标本夹夹住，将观察位置移至低倍镜正下方，镜台升至距装片0.5cm处，适当缩小光圈然后两眼从目镜观察，转动粗调节器使镜台下降至发现物像时，改用细调节器调节到物像清楚为止。移动装片，把合适的观察部位移至视野中心。

4. 高倍镜观察染色装片

眼睛离开目镜从侧面观察，旋转物镜转换器，将高倍镜转至正下方，注意避免镜头与玻片相撞。再由目镜观察，仔细调节光圈，使光线的明亮度适宜。用细调节器校正焦距使物镜清晰为止。将最适宜观察部位移至视野中心。不要移动装片位置，准备用油镜观察。

5. 油镜观察染色装片

提起镜筒约2cm，将油镜转至正下方。在玻片标本的镜检部位(镜头的正下方)滴一滴香柏油；从侧面注视，小心慢慢降下镜筒，使油镜浸在油中至油圈不扩大为止，镜头几乎与装片接触，但不可压及装片，以免压碎玻片，损坏镜头；

将光线调亮，从目镜观察，用粗调节器将镜台徐徐下降(切忌反方向旋转)，当视野中有物像出现时，再用细调节器校正焦距。如末找到物像，必须再从侧面观察，将油镜降下，重复操作直至物像看清为止。仔细观察并绘图；再次观察提起镜筒，换上细菌三型染色装片，依次用低倍镜、高倍镜和油镜观察，绘图。重复观察时可比第一次少加香柏油。

6. 镜检完毕后的工作

下降镜台，取出装片；清洁油镜，油镜使用完毕后，须用擦镜纸擦去镜头上的香柏油，再用擦镜纸沾少许擦镜液擦掉残留的香柏油，最后再用干净的擦镜纸擦干残留的擦镜液；擦净显微镜，将各部分还原。将接物镜呈“八”字形，不可使其正对聚光器，同时降下聚光器，转动反光镜使其镜面垂直于镜座。最后套上镜罩，对号放入镜箱中，置阴凉干燥处存放。

（二）微生物基本实验技术

1．用单层报纸螺旋包扎移液管。

2．用两层报纸包扎培养皿。

3．用四层报纸包扎试管。

4．做棉棉塞

五、注意事项

1．使用油镜必须按先用低倍镜和高倍镜观察，再用油镜观察。

2．上升镜台时，一定要从侧面注视，切忌用眼睛对着目镜，边观察边上升镜台的错误操作，以免压碎玻片而损坏镜头。

3．使用擦镜液擦镜头时，注意擦镜液不能过多，以防溶解固定透镜的树脂。

4．注意保持显微镜的洁净，对金属部分要用软布擦拭，擦镜头必须用擦镜纸，切勿用手或用普通布、纸等，以免损坏镜头。

六、实验报告

分别绘制油镜下观察到的三类细菌的形态，注明物镜放大倍数和总放大率。

七、问题和思考

1．用油镜便于观察细菌的依据是什么？

2．使用油镜应特别注意哪些问题？

3．当物镜从低倍镜转到高倍镜和油镜时，对照明度有何要求？应如何调节？

油镜的基本原理

一、实验目的

1. 复习显微镜低倍镜和高倍镜的使用技术。

2. 了解油浸系物镜的基本原理，掌握油浸系物镜的使用方法。

3. 掌握微生物实验的操作技能。

二、实验内容：

1．学习油浸系物镜的使用方法。

2．用油镜观察细菌和酵母菌染色装片。

3. 学习微生物实验的操作技能。

三、实验材料和用具

细菌三型、酵母菌染色装片；显微镜、香柏油、擦镜液、擦镜纸；试管、培养皿、移液管、纱布、棉花等。

四、操作步骤

（一）显微镜油浸的使用

1．将显微镜置于平稳的实验台上，镜座距实验台边沿约为4cm，坐正。

2．调节光源：将低倍物镜转到工作位置，把光圈完全打开，聚光器升至与载物台相距约1mm左右。转动反光镜采集光源，光线较强的天然光源宜用平面镜，光线较弱的天然光源或人工光源宜用凹面镜，对光至视野内均匀明亮为止。观察染色装片时，光线宜强；观察末染色装片时，光线不宜太强。

3. 低倍镜观察染色装片

首先下降镜台，将酵母菌染色装片置于载物台上，用标本夹夹住，将观察位置移至低倍镜正下方，镜台升至距装片0.5cm处，适当缩小光圈然后两眼从目镜观察，转动粗调节器使镜台下降至发现物像时，改用细调节器调节到物像清楚为止。移动装片，把合适的观察部位移至视野中心。

4. 高倍镜观察染色装片

眼睛离开目镜从侧面观察，旋转物镜转换器，将高倍镜转至正下方，注意避免镜头与玻片相撞。再由目镜观察，仔细调节光圈，使光线的明亮度适宜。用细调节器校正焦距使物镜清晰为止。将最适宜观察部位移至视野中心。不要移动装片位置，准备用油镜观察。

5. 油镜观察染色装片

提起镜筒约2cm，将油镜转至正下方。在玻片标本的镜检部位(镜头的正下方)滴一滴香柏油；从侧面注视，小心慢慢降下镜筒，使油镜浸在油中至油圈不扩大为止，镜头几乎与装片接触，但不可压及装片，以免压碎玻片，损坏镜头；

将光线调亮，从目镜观察，用粗调节器将镜台徐徐下降(切忌反方向旋转)，当视野中有物像出现时，再用细调节器校正焦距。如末找到物像，必须再从侧面观察，将油镜降下，重复操作直至物像看清为止。仔细观察并绘图；再次观察提起镜筒，换上细菌三型染色装片，依次用低倍镜、高倍镜和油镜观察，绘图。重复观察时可比第一次少加香柏油。

6. 镜检完毕后的工作

下降镜台，取出装片；清洁油镜，油镜使用完毕后，须用擦镜纸擦去镜头上的香柏油，再用擦镜纸沾少许擦镜液擦掉残留的香柏油，最后再用干净的擦镜纸擦干残留的擦镜液；擦净显微镜，将各部分还原。将接物镜呈“八”字形，不可使其正对聚光器，同时降下聚光器，转动反光镜使其镜面垂直于镜座。最后套上镜罩，对号放入镜箱中，置阴凉干燥处存放。

（二）微生物基本实验技术

1．用单层报纸螺旋包扎移液管。

2．用两层报纸包扎培养皿。

3．用四层报纸包扎试管。

4．做棉棉塞

五、注意事项

1．使用油镜必须按先用低倍镜和高倍镜观察，再用油镜观察。

2．上升镜台时，一定要从侧面注视，切忌用眼睛对着目镜，边观察边上升镜台的错误操作，以免压碎玻片而损坏镜头。

3．使用擦镜液擦镜头时，注意擦镜液不能过多，以防溶解固定透镜的树脂。

4．注意保持显微镜的洁净，对金属部分要用软布擦拭，擦镜头必须用擦镜纸，切勿用手或用普通布、纸等，以免损坏镜头。

六、实验报告

分别绘制油镜下观察到的三类细菌的形态，注明物镜放大倍数和总放大率。

七、问题和思考

1．用油镜便于观察细菌的依据是什么？

2．使用油镜应特别注意哪些问题？

3．当物镜从低倍镜转到高倍镜和油镜时，对照明度有何要求？应如何调节？

油镜的基本原理