人参提取工艺研究

更新日期：2011-01-24 点击： 张玲　单卫华　梁瑞雪　时延增　尚立霞　陈文浩　胡庆文

摘要：以人参皂甙Rg1及人参二醇为检测指标，考察了不同提取工艺对人参各有效成分含量的影响，并探讨了乙醇回流提取的最佳工艺条件。筛选制定了确保人参制剂质量及疗效的提取工艺。

关键词： 人参；　人参皂甙Rg1；　人参二醇；　薄层扫描

中图分类号：R284.2　　文献标识码：A　　文章编号：1008-0805(2000)09-0777-02

Study of Extraction Processes in Panax ginseng

ZHANG Ling，SHAN Wei-hua，LIANG Rui-xue，SHI Yan-zeng，SHANG Li-xia，CHEN Wen-hao，HU Qing-wen

(Shandong Institute of Biopharm, Jinan 250014, China)

Abstract: The paper reports the effect of different extraction processes on ginsenoside Rgl and panaxadiol in Panax ginseng, and explores the best process condition of alcohol extraction.

Key words: Panax ginseng;　Ginsenoside Rgl;　Panaxadiol;　TLC

　　中医使用人参 Panax ginseng C. A. Meyer 已有几千年的历史。目前临床上以人参为主药的中成药有数十种。传统人参采用粉末入药或渗漉提取，现代多采用不同浓度乙醇回流提取［1，2，3］，亦有用渗漉工艺。作者在研究人参制剂时，发现不同提取工艺对人参有效成分人参皂甙、人参二醇含量影响较大。为更好地发挥人参的药用功效，本文探索了人参最佳提取工艺条件。采用薄层扫描法，以人参皂甙Rg1和人参二醇为检测指标，考察了不同提取工艺以及不同醇提浓度对上述有效成分的影响。筛选制定了确保人参制剂质量与疗效的提取工艺。

1　材料与仪器

　　对照品：人参皂甙Rg1与人参二醇由中国药品生物制品检定所提供。

　　药材：人参购自济南药材站，由山东省中医药研究所生药室彭广芳研究员鉴定。

　　试剂：均为分析纯。

　　仪器：CS-9301薄层扫描仪(日本岛津公司)；PBQ-I型薄层自动铺板器(重庆南岸新力实验电器厂)；定量毛细管(美国Drummond厂)。

2　不同提取工艺样品液的制备

2.1　乙醇渗漉法：人参粉碎成粗颗粒(过20目筛)，称取100 g，照渗漉法［4］项下操作，用70%乙醇作溶剂，浸泡1周后，进行渗漉，共加入30倍量乙醇，合并渗漉液，回收乙醇，浓缩成每4 ml含1 g人参药材的浓缩液，备用。

2.2　乙醇回流提取法：取人参片100 g，加8倍量70%乙醇，共提取2次，3 h/次，合并提取液，回收乙醇，浓缩成每4 ml含1 g人参药材的浓缩液，备用。

2.3　水提醇沉法：取人参片100 g，加水煎煮2次，3 h/次，合并煎液，减压浓缩至相对密度1.14～1.16，加入乙醇，使醇浓度为70%，冷藏，次日减压回收乙醇，浓缩成每4 ml含1 g人参药材的浓缩液，备用。

2.4　人参药

材样品液的制备：取人参粉末3 g，加水2 ml，拌匀湿润后，加水饱和的正丁醇30 ml，超声处理50 min，滤过，滤液回收正丁醇至尽，得浓缩液。

3　不同提取工艺样品中人参皂甙Rg1及人参二醇的含量测定

3.1　薄层层析

　　层析板：硅胶G-0.2% CMC薄层板。

　　展开剂：以溶剂系统Ⅰ：氯仿-甲醇-水(7∶3∶0.5)10℃以下展开分离人参皂甙Rg1；以溶剂系统Ⅱ：苯-丙酮(5∶2)分离人参二醇，展距为10 cm，结果见图1，图2。

图1　人参皂甙Rg1及不同工艺样品的薄层色谱

　　　　　　　　　1.人参皂甙Rg1对照品　　2.渗漉工艺

　　　　　　　　　3.乙醇回流提取工艺　　　4.水提醇沉工艺

3.2　扫描条件：将供试液点于薄层板上，分别以展开剂Ⅰ，Ⅱ层离，显色，进行反射式锯齿形扫描，人参皂甙Rg1 λs=525 nm；人参二醇λs=525 nm；λR均为680 nm；线性参数Sx=3；狭缝1.2 cm×1.2 cm；扫描速度20 mm/min；纸速20 mm/min。

3.3　人参皂甙Rg1含量测定

3.3.1　人参皂甙Rg1与峰面积线性关系与范围：精密吸取人参皂甙Rg1对照品的甲醇溶液(1 mg/ml)1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 ml分别点在同一薄层板上，层离，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃烘至斑点清晰，按上述条件扫描，以浓度为横坐标，测得斑点峰面积为纵坐标作图，回归方程为Y=625.10 X-150.00，γ=1.000。结果表明，人参皂甙Rg1浓度在1～5 μg范围内与其峰面积呈线性关系。

3.3.2　精密度试验：同一斑点连续扫描5次，测得变异系数RSD=0.74%；同一薄层板5个同样量的各对照品溶液，测得面积，计算变异系数RSD在2.17%～2.79%之间；5块不同薄层板相同量的各对照品溶液的斑点，测得RSD为2.97%。

3.3.3　稳定性试验：精密吸取对照品溶液，点于薄层板上，层离，溶剂挥干，显色后立即扫描，再扫描1次/20 min。结果表明，人参皂甙Rg1斑点在1 h内稳定。

3.3.4　回收率测定：精密吸取回流提取工艺样品液3份，分别加入精密称定的人参皂甙Rg1对照品，依法测定，平均回收率=95.45%，RSD=2.69%。

3.3.5　样品分析：精密吸取上述3种工艺浓缩液各8 ml，另取相当于2 g原药材的人参药材浓缩液加水至8 ml，分别用氯仿提取2次，10 ml/次，弃去氯仿液，水液用水饱和的正丁醇提取4次，8 ml/次，合并提取液，挥去正丁醇，残渣用甲醇溶解，并定容至1 ml容量瓶中，作为测定人参皂甙Rg1的样品供试液。精密吸取人参皂甙Rg1对照品溶液2，4 μl及不同工艺供试液各4 μl，按上述方法测定人参皂甙Rg1含量(外标两点法)，结果见表1。

表1　不同工艺样品中人参皂甙Rg1、人参二醇含量mg/g

方法 人参皂甙Rg1 人参二醇

渗漉法 1.81 1.039

乙醇回流提取 2.16 1.315

水提醇沉法

0.76 0.593

　　注：以上数据为3次平行实验平均值；n=3

3.4　人参二醇含量测定

3.4.1　人参二醇浓度与峰面积的线性关系与范围：精密吸取人参二醇对照品的氯仿溶液(1 mg/ml)0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 μl，分别点于同一含0.3%羧甲基纤维素钠的硅胶G薄层板上，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃烘至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，于暗处放置1 h后，按上述条件进行扫描，以对照品的面积积分值为纵坐标，点样量为横坐标，绘制标准曲线，回归方程为：Y=7 1.71 X+2 248.83，γ=1.000。上述结果表明，人参二醇点样量在0.51～5.1 μg范围内与面积积分值呈良好的线性关系。下载本文