一、实验原理

在中性条件下用过硫酸钾（或－高氯酸）使试样消解，将所含磷全部氧化为正磷酸盐。在酸性介质中，正磷酸盐与钼酸铵反应，在锑盐存在下生成磷钼杂多酸后，立即被抗坏血酸还原，生成蓝色的络合物。  

二、实验仪器

可见分光光度计，消解装置，比色管。 

三、药品配制

1. 1:1硫酸（H2SO4）溶液 

2. 100g/L抗坏血酸（C6H8O6）溶液：称取10g抗坏血酸溶于水中，稀释至100mL。 贮存于棕色瓶中。 

3.钼酸盐溶液：称取13g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O]于100mL水中。溶解0.35g 酒石酸锑钾[KSbC4H4O7·H2O]于100mL水中。在不断搅拌下把钼酸铵溶液 徐徐加到300mL 1:1硫酸中，加酒石酸锑钾溶液并且混合均匀。此溶液贮存于棕色试剂瓶中。  

4.磷标准贮备溶液：称取0.2197±0.001g于110℃干燥2h在干燥器中放冷的磷 酸二氢钾(KH2PO4)，用水溶解后转移至1000mL容量瓶中，加入大约800mL水、加5mL 1:1硫酸用水稀释至标线并混匀。1.00mL此标准溶液含50.0μg磷。  

5.磷标准使用溶液：将10.0mL的磷标准贮备溶液转移至250mL容量瓶中，用 水稀释至标线并混匀。1.00mL此标准溶液含2.0μg磷。  

6.50g/L过硫酸钾（K2S2O8）溶液：称取5g过硫酸钾溶于水，稀释至100mL。 

7.6 mol/L氢氧化钠（NaOH）溶液：称取24g氢氧化钠溶于水中，稀释至100mL。 调样品pH用。  

8.6 mol/L氢氧化钠（NaOH）溶液：称取24g氢氧化钠溶于水中，稀释至100mL。  

9. l mol/L  H2SO4溶液：将27mL硫酸，加入到973mL水中。 

10. 10g/L酚酞指示剂：称取0.5g酚酞溶于50mL 95％乙醇中。 

注：未说明的实验试剂均为标准分析纯或者实验纯药品。  

四、实验步骤

1.取待测样品，摇匀。将待测样品和空白样品消解，冷却。 绘制磷标准曲线。将处理后的试样（待测试样和空白试样），加入抑制剂和显色剂，显色。显色后放置一段时间，测吸光度。

2.洗涤并标记实验仪器：  药品标记：药品名称、药品浓度、配制时间、配制人员；  比色管、具塞刻度管（或锥形瓶）标记：ZL-BX-0、ZL-BX-1、ZL-BX-2、ZL-BX-3、ZL-BX-4、ZL-BX-5、ZL-BX-6、ZL-CK-1、ZL-CK-2、ZL-CK-3、ZL-YP-1、ZL-YP-2、ZL-YP-3。（字母意义：ZL-总磷、BX-标线、CK-空白、YP-样品）。  

3.将样品摇匀后，取样品25mL于具塞刻度管（或者锥形瓶）中，准备消解。  a．过硫酸钾消解：向试样中加4mL 50g/L过硫酸钾，将具塞刻度管的盖塞紧后，用一小块布和线将玻璃塞扎紧(或用其他方法固定)，放在大烧杯中置于高压蒸汽消毒器中加热，待压力达1.1kg/cm2、相应温度为120℃时，保持30min，然后停止加热。待压力表读数降至零后，取出放冷。然后用水稀释至标线。   

注：如用硫酸保存水样。当用过硫酸钾消解时，需先将试样调至中性。 b．-高氯酸消解：向锥形瓶中，加数粒玻璃珠，加2mL，然后在电热板上加热浓缩至10mL。冷后加5mL，再加热浓缩至10mL，放冷。加3mL高氯酸，加热至高氯酸冒白烟，此时可在锥形瓶上加小漏斗或调节电热板温度，使消解液在锥形瓶内壁保持回流状态，直至剩下3～4mL，放冷。  加水10mL，加1滴酚酞指示剂。滴加6 mol/L氢氧化钠溶液至刚呈微红色， 再滴加l mol/L  H2SO4溶液使微红刚好退去，充分混匀。移至具塞刻度管 中，用水稀释至标线。  

4.绘制标准曲线：在7个已标记的具塞刻度管中，依次分别加入0.00mL、 0.50mL、1.00mL、3.00mL、5.00mL、10.00mL、和15.00mL 氨氮标准工作溶液，其所对应的氨氮含量分别为0.0µg、1.0µg、2.0µg、6.0µg、10.0µg、20.0µg、和30µg，加水至标线。加入1.0mL抗坏血酸溶液，摇匀，30s后再加入2.0mL钼酸盐溶液，充分摇匀。放置15min后，在波长700nm下，用30mm比色皿，以水作参比，测量吸光度。以空白校正后的吸光度为纵坐标，以其对应的氨氮含量（µg）为横坐标，绘制校准曲线；  

5.测定消解后的样品、空白对照的吸光度：向装有待测液的具塞刻度管中加入 1.0mL抗坏血酸溶液，摇匀，30s后再加入2.0mL钼酸盐溶液，充分摇匀。放置15min后，在波长700nm下，用30mm比色皿，以水作参比，测量吸光度。 

五、实验结果与数据处

1.原始数据  

（1） 实验药品配制原始数据： 硫酸溶液：  抗坏血酸溶液： 钼酸盐溶液： 磷标准贮备溶液： 磷标准使用溶液：   

（2） 消解方法所需实验药品配制原始数据： （3） 标准曲线原始数据：  表1-1 氨氮标准曲线原始数据 

水中总磷的浓度按以下公式计算：   

下载本文