实验1 大肠杆菌的培养和分离
1、微生物指的是_______________________的单细胞、多细胞或______________的低等生物。如：__________________________等。绝大多数微生物与传染病________（有关/无关），90%以上的微生物是对人类___________（有利/有害）。
2、大肠杆菌是革兰氏______性菌，新陈代谢类型是______________。从细胞结构上看，它属于_______生物。在肠道中一般对人体无害，也有少数菌株对人体_____，可以侵袭_______并产生______。但是，任何大肠杆菌如果进入人的___________，都会对人体产生危害。大肠杆菌是_____工程中被广泛采用的工具。如重组的人粒细胞-巨噬细胞___________（rhGM-CSF）就是用大肠杆菌工程菌生产的。这种刺激因子是一种________，只要用_____级的量即可提高人的白细胞的数量，目前是放疗和化疗过程中的必用辅助药物。大肠杆菌细胞壁的主要成分是_____________，细胞质中含有的细胞器是_________，控制细菌遗传性状的DNA主要分布在___________，此外，细胞质中也有小型的
环状DNA称为____________。
3、革兰氏染色法是一种用于__________的染色法。此法将细菌分为两大类，即革兰氏阳性菌和_______________。
4、各类生物细胞壁的成分：植物_________________ 细菌_______________ 真菌_______________
5、细菌通常以_________方式繁殖，________________在固体培养基上大量繁殖形成的________________的细胞群统称为单菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。单菌落的分离是_______________的通用方法，也是用于_________________________________________________。
6、细菌培养的通用培养基是__________,其液体培养基的配方（以1升为例）：___________________________________，
若要配制固体培养基则需加入_____________；培养基的分类：按物理性状____________________________________，
按化学成分____________________________________；按用途_______________________________________
7、细菌喜________，霉菌喜________；细菌通常要求在____________________的环境中生长，霉菌要求在____________________的环境中生长。
8、常用的细菌分离方法：划线分离法和__________________，前者的具体操作是：用已经在_____________烧红后冷却的____________蘸取带菌的培养物，在____________（固体/液体）培养基的平板上划线。其中烧红的目的______________________，冷却的目的_____________________。 接种环部分深入到菌液中，然后，在固体培养基的平板上___________划线。注意：接种环只在菌液中蘸菌液____________次。每次划完线，接种环都要______________（原因是________________________）并冷却（原因是______________________）后从_______________________开始再重新划线（原因是_______________________________），最后，在划线的末端出现___________________________，表明菌已被分离。如果再将单个菌落接种至固体培养基的试管斜面上，即在斜面上划线，则斜面上的菌群就是单个细胞产生的后代。 制成斜面培养基是为了_______________________，且斜面密闭效果比平面的好很多,不容易进入杂菌,同时能用来做纯细菌的___________________。但斜面过长就会使棉塞沾上培养基而造成污染，所以使培养基形成的斜面的长度不超过试管总长的________________。后者的具体操作是：将培养的菌液稀释成10-5—10-7倍。（举例说明如何稀释10倍？_____________________________________________）取_________稀释倍数不同的菌液，加在培养皿的固体培养基上，用_____________（该器具的灭菌方法_______________________________________________）涂布在培养基的平面上，然后进行培养。在某个稀释度下，可培养得到不连续的菌落，通常以每个培养皿中有__________个以内的单菌落最为合适。这两种细菌的分离方法的优缺点是？____________________________________
9、写出消毒和灭菌的区别____________________________________________________________________
10、灭菌或消毒的常用方法有:__________________________________________________________________________，
不同的器具应选择合适的方法灭菌。接种环等金属应选用的灭菌方法是：_________________，操作者的手应选用的消毒方法是：________________，培养基应选用的灭菌方法是：______________________，若培养基中有葡萄糖，则
要用500g/cm2压力（______℃以上）灭菌30min，这是为了防止：______________________________，超净台应选用的灭菌方法是：_____________________________。有些不能加热灭菌的化合物，如___________（加热会分解），可用_______________________过滤使之无菌。类似器皿有6种，该器皿G6孔径最小，______________不能滤过。用后需用______________浸泡，并______________，再用___________洗至洗出液呈_________性，干燥后保存，使用前需用高压蒸汽灭菌法灭菌。所有仪器灭菌后，通常要放入_________中烘干，以除去灭菌时的水分。实验操作前，将用具取出，放到超净台上。使用高压蒸汽灭菌前，一定要将灭菌锅内的______________排尽。灭菌完毕后，要等_____________________________时，才能打开气阀，否则，瓶内的培养基会冲出瓶口。
11、倒平板时，要将有培养基的三角瓶和培养皿等放到超净台上，打开超净台的紫外灯和过滤风。待固体培养基冷却至_______℃时，可准备倒平板。倒平板前要将超净台的__________关闭，用___________擦拭操作者的手，并在________________________进行。将三角瓶内的固体培养基倒入培养皿中，使之置于水平位置，并轻轻晃动，使培养基__________________，凝固后即可形成平面。
12、将大肠杆菌接种至液体培养基中的目的是________________。操作前要将接种环在火焰上烧红，再深入到斜面。接种前，应使接种环接触培养基中_______________的部位以达到冷却的目的，然后接触有菌种的部位取菌体。接种后，将三角瓶放在_________℃，每分钟200转的___________上振荡培养12h。
13、最后，将培养皿___________，在__________________中培养12-24h后，可看到在划线的末端出现不连续的单个菌落，表明菌已被分离。接种至斜面保存。在无菌操作下，将单菌落用接种环取出，再用划线法接种在斜面上，37℃培养24h，置_________________中保存。
实验2 分离以尿素为氮源的微生物
1、 脲或称_______，是__________的产物。人和其他哺乳动物的_______中都含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。有一些细菌含有____酶，它们可以通过降解尿素作为其生长的氮源。这类细菌可从土壤中分离出来。
2、 反应式：__________________________________________
3、 尿素固体培养基，其成分是0.025g_____________，0.12g____________，0.12gK2HPO4,0.25mg___________和0.5g___________，水15mL。灭菌时用500g/cm2压力（______℃以上），灭菌30min。灭菌后待冷却至60℃时，加入通过______________过滤的10mL尿素溶液，摇动，混合均匀后待用。
4、 本实验用琼脂糖而不用琼脂的原因是？_______________________________________________________________
5、 在无菌条件下，将1g土样（从______________________取得）加入到含有99mL无菌水的三角瓶中，振荡10min，即成_________土壤稀释液。依次制备10-3、10-4、10-5土壤稀释液。取样时，尽量只取悬液。摇匀，放在试管架上。
6、 将培养皿倒置，在37℃恒温箱中培养24-48h，观察菌落数。这样统计的菌落数常比实际数量要_________（多/少）。有脲酶的细菌菌落周围会出现_____________。
实验4 果汁中的果胶和果胶酶
1、果胶是植物___________的主要成分，存在于____________________，果胶是细胞间的粘连成分，起着________________________________________的作用，去掉果胶，就会使植物组织变得___________，也是果汁中的成分。____________________可水解果胶，与制取果汁有关。果胶是由__________________________组成。果胶的特性：不溶于____________，若加它，果胶会______________，这是鉴定果胶的一种简易方法。
2、果胶酶广泛分布于高等植物和微生物中，如__________________等。本质是_______________，果胶酶作用原理：①瓦解植物的___________________________，使榨取果汁更容易。②把果胶分解为_____________________，使浑浊的果汁变得澄清。
实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测
1、固定化酶的概念：____________________________________________________，优点___________________________，缺点：____________________________________
2、固定化酶的方法：_____________________________________________________，写出其中两种方法常用的介质：__________________________________________。
3、本实验使用的是提取自_____________的α-淀粉酶，其作用的最适pH为______________，最适温度为________________。对该种微生物进行扩大培养可用________________。本实验的α-淀粉酶可通过___________法固定在介质_____________上。
4、本实验的实验原理：淀粉在_________的催化下变成__________，用____________检测显__________；该产物在__________催化下变成______________；该产物又在____________催化下变成_______________。
5、制备固定化α-淀粉酶：① 在烧杯中将5mg _______________溶于4ml蒸馏水中。由于酶不纯，可能有些不溶物。再加入5g____________，不时搅拌，30min后装入1支下端接有_________并用夹子封住的___________中(石英砂体积约4ml)。②用____________的蒸馏水洗涤此注射器，流速为____________。目的是____________________________________③在试管中加入1mL________________，再加入几滴淀粉酶柱的_____________，混合后用手握住试管增加___________，几分钟后加入1-2滴_____________。若显蓝色，则说明：______________________
6、α-淀粉酶对淀粉水解作用的检测:①将灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上，用滴管滴加_______________（配制该溶液要用____水），使其以______________的流速过柱（原因是___________________________________）。在流出5ml后（原因是______________________________________________）接收0.5ml流出液，加入1~2滴KI-I2溶液，观察颜色。用水稀释1倍后再观察颜色。②实验后，用____________________的蒸馏水洗涤此柱（目的是___________________________________________），放置在____________中，几天后再重复上述实验，看是否有相同的结果。
实验8 果酒及果醋的制作
1、与酒生产有关的微生物是_____________，其代谢类型_________________，繁殖方式_________________，在有氧条件下，酵母菌进行需氧呼吸，___________，反应式是：____________________________________________________；其在无氧条件下，进行酒精发酵，将葡萄糖氧化成____________，当培养液中该物质浓度超过___________时，酵母菌会死亡。葡萄糖氧化成乙醇的反应式为：_____________________________________________________
2、制作葡萄匀浆： 将2.5-5kg的成熟的葡萄先用____洗净，再在_________的____________溶液（作用是_____________________）中浸泡5min，再用____________冲洗。沥去水后，用多功能榨汁机___________（原因是_________________）将葡萄打成匀浆（也可用手工捣烂）。
3、制备酵母悬液:在烧杯中加入适量（2.5kg葡萄约用1g干酵母）干酵母，再加入少量_________（<________℃），使干酵母成__________，为使酵母快速发生作用可加极少量________（目的是________________________________），混匀，放置片刻。待酵母悬液中出现____________即可。
4、将葡萄浆放入________中，装量不要超过_______（原因是_________________________________________________），然后加入酵母悬液，搅拌均匀。瓶口加上___________或者____________，塞的结构要求是：瓶塞制作一个孔，孔上需要插一根装_____________________（作用是_______________________________________________________________），若用直的玻璃管代替，效果_______________。
5、在无氧条件下，将发酵瓶置于____________℃条件下，发酵2-3d。当发酵瓶中停止出现_________，表示发酵完毕。若温度偏低，则发酵时间会延长，如果温度高于30℃，要采取_______________措施，否则酒的风味不佳。发酵完毕，过滤以除去___________________，上清液即为_____________。常温下，可以保存1-2年。所以，果酒制作“先___________后__________，先有水后有酒”这种方法直接用葡萄浆作原料，只加极少量的蔗糖，所以制作的葡萄酒____________________________。
6、在发酵开始时，发酵瓶内会出现___________现象，原因是________________________________________。3d后可看到气泡冒出。若3d后还看不到气泡冒出，必须_________________________，使发酵尽快发生，否则会使实验失败。10d后，剧烈的发酵停止。过滤和分装，静置5-6个月后，酵母下沉，上清液即为果酒，可用____________法取出。
7、与醋生产有关的微生物是______________，其代谢类型是______________，其在有氧条件下将乙醇氧化为__________，产生的产物高达_________。乙醇氧化为醋酸的反应式：_____________________________________________
8、 醋杆菌可用__________________（此液体培养基（1L）的配方：___________3g、酵母提取物5g、___________25g（作用__________________________________________________），然后用300mL的锥形瓶振摇培养48h（振摇可用_________，搅拌可用_______________）后，再接种到发酵瓶中。）扩大培养，再接种到含比例为1:4的酒—水混合液的发酵瓶中，如果没有扩大培养的条件，菌种也可用___________取代。
9、甲瓶的用途：______________________________，乙瓶的用途：_________________________，丙瓶的用途：_____________________；乙瓶中装有的内容物为：将适量的醋化醋杆菌培养物或醋曲悬液加在200mL酒—水混合物中混匀，并调pH至7.0（用0.1mol/LNaOH）后倒入乙瓶（装_______满的锯末）中，使锯末（作用____________）______________。乙瓶底部需要一双孔的橡胶塞，一个孔插直角玻璃管联通丙瓶,另一个直角玻璃管，管内塞____________，不要塞的太紧，联通________________，此管的另一端要升至______________。控制甲瓶液体滴入乙瓶的速度_____________，控制乙瓶滴入丙瓶的速度也是______________。等流入丙瓶的流出液_________不再减小，或_____________________________时，停止实验。
实验10 泡菜的腌制和亚的测定
1、 泡菜腌制过程中起作用的主要是________________________。所用的原料是白菜、洋白菜等。在___________条件下，微生物利用菜中的______________________进行发酵。发酵产物有____________________物质等，其中也有一定量的_________________（主要指亚钠NaNO2）。若发酵时间过长，则霉菌生长过多会产生霉变味。
2、 泡菜制作过程:1、选择新鲜蔬菜（原因是_____________________________________），洗净，并切成3-4cm长的小块。2、将泡菜坛洗净，并用___________洗坛内壁2次。3、将切好的蔬菜、盐水（加盐不要_____且盐水________________）、糖及调味品放入坛，混合均匀。如希望发酵快些，可将蔬菜在开水中浸泡1min后入坛，再加一些白酒。4、将坛口用______封好，防止____________进入。5、腌制______左右即可开坛食用，也可随时加入新鲜蔬菜，不断取用。6、如果加入一些_______________________更好，这相当于__________________________，可减少腌制时间。
3、 在___________条件下，亚盐（主要指亚钠NaNO2）可与____________________发生重氮化反应，这一产物再与_________________________偶联，形成______________产物，可用_________________法定量，也可用目测法定性。
4、 取10mL样品溶液，加入4.5mL氯化铵缓冲液、2.5mL60%___________和5mL的显色液，定容于25mL的容量瓶中。混合均匀，暗处静置25min，用光程为1cm的比色杯在______________处测定_______________（__________）。以10mL水为空白对照。
5、 以__________________为横坐标，以________________为纵坐标，绘制曲线图。
实验11 植物的组织培养
1、组织培养就是取一部分植物组织，如叶、芽、茎、根、花瓣或花粉等，在无菌条件下接种在三角瓶中的琼脂培养基上，给予一定的温度和光照，使之产生______________，或进而生根发芽。
2、组织培养的培养基中必须加入细胞素和__________，两者的摩尔浓度比决定组织是生根，还是生芽。当前者与后者的比例高时，诱导__________的生成；两者比例大致相等时，___________继续生长而不分化；两者比例低时，会趋于__________。
3、植物组织培养的过程：_______________________________________________________________________________
4、植物组织培养的原理：_____________________，定义_______________________________________________________，
原因___________________________________________________________________________________
6、 植物细胞培养的通用培养基____________________，由_______________________________________组成。其作用分别是_____________________________________________、____________________________________________。使用时，也可以分别配制成浓度为配方的5-10倍的____________，用时_____________。
7、 人工合成的生长素是____________简称___________；人工合成的细胞素是____________简称___________；用人工植物激素的原因是______________________________________________________________。
8、 外植体消毒：自然生长的茎可先在____________中浸泡10min，再放入________________中浸泡5min，然后在另一_____________________中浸泡5min，最后在超净台中用______________清洗；外植体若取自______________的植株则不需要消毒。
9、 接种：在______________旁，将茎的一部分（至少有1张叶片）________入__________培养基，盖上封口膜。
10、 发芽培养：保持_____________℃的温度培养，每天的___________不少于14.5h，使长出较多的________________
11、 生根培养： 2-3周后将生长健壮的丛状苗分株后，在_________条件下再移入生根培养基。
12、 ______________：待生根后，将苗移至_________________中，再保持______________的湿度，2-3d后打开玻璃罩逐渐_____________进行锻炼，直到将罩全部打开处于_______________下为止。
13、 定植：移植到土中培养，即可长成植株并开花。下载本文
