一、基因工程
1.基因工程原理是 ，操作水平是 水平。优点： ；定向地改造生物的遗传性状。核心步骤是
2.“分子手术刀”—— ，主要从 中分离纯化出来，能使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 断开，选择 切割目的基因和载体，原因是 。酶切割有两种末端类型 和
3DNA连接酶能缝合两个DNA片段间的 。
4.运载体具备的条件：①能够稳定保存并复制 ；②有一至多个 酶切位点 ③含有 ，便于筛选。④对受体细胞无害。最常用的载体是 。
5基因工程的基本操作程序
。
6.基因序列未知，用 方法获取目的基因。
基因序列已知，用 方法获取目的基因
用 扩增目的基因 ，需要在反应体系中添加 、DNA模板、 核苷酸
7将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是 。首先将重组质粒导入到农杆菌，常用 处理该细菌，以增加 的通透性，再用农杆菌去侵染植物细胞。
将目的基因导入动物细胞最常用的方法是 。此方法的受体细胞多是 。
将目的基因导入微生物细胞，其转化方法是：先用 处理细胞，使其成为 ，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子
8.检测目的基因是否表达，用相应的抗体进行 。有时还需进行 生物学水平的鉴定。
检测目的基因是否整合到染色体上用 方法
检测目的基因是否转录除mRNA用 方法
二动物细胞培养
1.动物细胞培养的流程:取动物组织块→剪碎→用 处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行 培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理分散成单个细胞继续 培养。
2.悬液中分散的细胞很快就贴服在瓶壁上，称为 。细胞数目不断增多，当贴壁细胞生长到表面接触时，细胞就会停止增殖，这种现象称为 。
3.动物细胞培养通常要在培养液中添加一定量的 ，以防培养过程中的污染。培养基成分有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐等。通常需加 等天然成分。细胞培养所需气体中O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是 。
4从细胞系中筛选出一个细胞，通过 培养，使之繁衍成一个新的细胞群体，这个群体称为
5连续细胞系被认为是发生了转化的细胞系，大多数具有 核型
三胚胎工程（技术：体外受精、胚胎体外培养、胚胎移植、胚胎分割）
1采集到的精子在体外受精前必须进行 处理，采集的卵母细胞也需要成熟培养
2卵母细胞的采集和培养：用 处理供体，使其 ，从 中采集卵母细胞（要在体外培养成熟）。
3.早期胚胎培养：培养液的成分除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及 等物质。
4. 是胚胎工程其他技术的最后一道“工序”。胚胎移植大大缩短了供体本身的繁殖周期，充分发挥雌性 。
5.胚胎移植的操作程序中要先用 对受体和供体母牛进行 处理，使其与供体处于 再对供体母牛进行超数排卵处理，受精获得胚胎后，选择发育到 阶段的胚胎进行移植。
6.胚胎分割使来自同一胚胎的后代具有 的遗传物质，属于 繁殖。
选择 阶段的胚胎进行分割，要注意将 ，否则影响分割后胚胎的进一步发育。在显微镜下用 把胚胎分割开，或采用 酶处理将卵裂球中的细胞分散，分割的胚胎或细胞 移植给受体，或培养到 时期再移植给受体，囊胚的最外层称为
7．哺乳动物的胚胎干细胞简称 细胞，是由 中分离出来的一类细胞，在形态上表现为体积 ，细胞核 ，核仁明显；在功能上，具有发育的 ，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。
四动物克隆
1核移植技术：将细胞核导入 ，属于 繁殖。
2克隆羊多利的培养用到的技术有： 、 、
3能产生同卵多仔后代的一项技术是
五单克隆抗体的制备
给小鼠注射特定的 ，从它的脾脏中分离B淋巴细胞，利用仙台病毒、 、电融合等技术将其与骨髓瘤细胞融合，可能获得未融合细胞、同种融合细胞和杂交瘤细胞 等三类细胞，筛选其中的 ，对其进行 ，得到的细胞具有
特点。单克隆抗体的特点是
六植物组织培养
1将一个植物细胞培育成一个完整植物运用的技术是 ，原理是 ，
在该技术过程中，以 营养物质和生长调节剂诱导 形成愈伤组织，再诱导其 ，形成完整植株。
2用 水解细胞壁，获得 ，该过程要在 溶液中进行，该溶液的作用是 ，经培养形成愈伤组织，再通过 得到分散的胚性细胞，发育成 ，获得的植株经过多次继代培养后会丧失细胞全能性的表达能力，原因有遗传变异、激素平衡发生改变、组织对外源激素敏感性发生改变
3可用 诱导植物细胞融合下载本文
