(10)申请公布号 (43)申请公布日 2014.12.10

C N 1041760

A (21)申请号 2014104835.2

(22)申请日 2014.09.12

A61K 36/9066(2006.01)

A61P 1/16(2006.01)

A61P 13/04(2006.01)

(71)申请人四川圣湖生物科技有限公司

地址610207 四川省成都市双流县西航港经

济开发区创业中心

(72)发明人郭小雪 钟莉沙 张弘

钟雨禅 黄泽祥

(74)专利代理机构成都高远知识产权代理事务

所(普通合伙) 51222

代理人李高峡 杜朗宇

(54)发明名称

一种治疗结石的药物组合物及其制备方法和

用途

(57)摘要

本发明提供了一种治疗结石的药物组合物，

其原料药由如下重量配比的组分组成：金钱草

5-20份、海金沙5-20份、大黄10-30份、姜黄2-10

份、车前子15-35份、甘草5-10份、地肤子10-30

份、瞿麦10-35份、小茴香2-10份。本发明将金钱

草等9味药材组方使用后，在使用与单味药相当

或更低剂量的情况下，对结石的排出效果显著优

于单味药材，证明本发明9味药材组合后发挥了

协同增效作用；试验表明，本发明药物组合物，具

有降低组织结石数量，减少组织草酸含量，抑制草

酸钙结晶形成和堆积，使结晶松散，变小，变碎，易

随尿排出的作用，进而有效改善结石病引起的肾、

膀胱、尿道部位的疼痛及血尿等症状，减少对组织

器官的损伤，从而保护组织器官。(51)Int.Cl.

权利要求书1页 说明书8页

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页 说明书8页(10)申请公布号CN 1041760 A

金钱草5-20份、海金沙5-20份、大黄10-30份、姜黄2-10份、车前子15-35份、甘草5-10份、地肤子10-30份、瞿麦10-35份、小茴香2-10份。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：其原料药由如下重量配比的组分组成：

金钱草20份、海金沙20份、大黄30份、姜黄10份、车前子35份、甘草10份、地肤子30份、瞿麦35份、小茴香10份。

3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于：它是以原料药的药粉、水提物或/和有机溶剂提取物为活性成分，加上药学上常用的辅料或/和辅助性成分制备而成的剂型。

4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于：所述有机溶剂选自乙醇、含水乙醇、丙酮、甲醇、含水甲醇、正丁醇、含水正丁醇或乙酸乙酯。

5.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于：所述剂型为经胃肠道吸收剂型。

6.权利要求1～5任意一项所述药物组合物的制备方法，其特征在于：它包括如下操作步骤：

(1)按配比称取原料药；

(2)取各原料药，合并水提，所得水提物备用；或者，取各原料药，分别水提，所得各药材水提物备用；

(3)将水提物加上药学上常用的辅料或/和辅助性成分制剂，即可。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，提取方法为煎煮或超声。

8.权利要求1～5任意一项所述药物组合物在制备治疗或辅助治疗泌尿系统结石的药物中的用途。

9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于：所述药物是治疗或辅助治疗肾结石、膀胱结石或尿路结石。

10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于：所述保健品或药物是改善肾结石引起的腰部、上腹部疼痛、血尿的保健品或药物。

一种治疗结石的药物组合物及其制备方法和用途

技术领域

[0001] 本发明涉及一种治疗结石的药物组合物及其制备方法和用途。

背景技术

[0002] 结石病是人体异常矿化所致的一种以钙盐或脂类积聚成形而引起的一种疾病。在经济高速发展的今天，人的生活节奏加快、超负荷工作、生活无规律、饮食结构发生变化，结石病发病率越来越呈上升趋势。发病人群年轻化现象也越来越明显，25～50岁是高发人群，而女性尤其多发。

[0003] 结石是一种常见的多发病，其种类有肾结石、胆结石、胆管结石、膀胱结石、尿路结石等，患结石病会影响生产、生活和工作，严重时需要做手术，甚至危及生命。结石病的产生主要与饮食有关，特别是饮水，硬水钙质含量高，饮用此类水易产生结石；在饮食方面，如用石膏制成的豆制品等，多食也易患结石。结石病主要症状是疼痛和血尿，极少数病人可长期无自觉症状，待出现肾积水或感染时才被发现。

[0004] 目前，结石病的治疗方法以手术为主，适应面广，疗效稳定，费用较低，但患者需承受较大的痛苦。近年来，以内窥镜(纤胆镜，膀胱镜，输尿管肾镜)为主无疤痕的腔内激光碎石、气压弹道碎石，微创的腹腔镜胆囊切除术，皮肾镜碎石术各有特长，疗效稳定，但其设备价格昂贵，技术要求很高，且远期效果不理想(复发率高)；也有报道用药物进行排石的，但西医药物在治愈率和有效率方面还是不能令人满意，而且长期服用西药进行排石，会对人体产生较大的副作用。近年，中草药以其低毒性、多靶点治疗以及廉价的特点越来越受到重视，成为研发治疗结石病的新热点。

发明内容

[0005] 本发明的目的在于提供一种治疗结石的药物组合物。本发明的另一目的在于提供该组合物的制备方法和用途。

[0006] 具体地，本发明提供了一种治疗结石的药物组合物，其原料药由如下重量配比的组分组成：

[0007] 金钱草5-20份、海金沙5-20份、大黄10-30份、姜黄2-10份、车前子15-35份、甘草5-10份、地肤子10-30份、瞿麦10-35份、小茴香2-10份。

[0008] 进一步地，其原料药由如下重量配比的组分组成：

[0009] 金钱草20份、海金沙20份、大黄30份、姜黄10份、车前子35份、甘草10份、地肤子30份、瞿麦35份、小茴香10份。

[0010] 本发明物中所述金钱草为报春花科植物过路黄Lysimachia christinae Hance.的全草，用于肝胆及泌尿系结石，具有利水通淋、清热解毒、散瘀消肿的作用。其所含主要成分为斛皮素、异槲皮甙即槲皮素-3-O-葡萄糖甙、山柰酚、三叶豆甙等。现代研究表明金钱草具有排石、利胆、抗炎、抑制血栓等作用。

[0011] 海金沙为海金沙属植物小叶海金沙Lygodium japonicum(Thunb.)Sw.的干燥成熟孢子，用于尿路感染，尿路结石，具有清热解毒、利水通淋的作用。其所含主要成分为海金沙素、反式-对-香豆酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、十六碳烯酸、硬脂酸等。现代研究表明海金沙具有利胆保肝、抗菌、抗炎等作用。

[0012] 大黄为蓼科植物掌叶大黄Rheum palmatum L.、唐古特大黄Rheum tanguticum Maxim.ex Balf.或药用大黄Rheum officinale Baill.的干燥根及根茎，用于实热便秘，湿热泻痢，小便不利，具有攻积滞、清湿热、泻火凉血、祛瘀解毒的作用。其所含主要成分为大黄酚、大黄素、大黄素甲醚、大黄酸、番泻甙等。现代研究表明大黄具有泻下、利胆保肝、促进胰液分泌、抑制胰酶活性、抗胃及十二指肠溃疡、止血、降血脂、抗感染等作用。

[0013] 姜黄为姜科植物姜黄Curcuma longa L.的干燥根茎。用于胸胁刺痛，胸痹心痛，具有破血行气，通经止痛的作用。其所含主要成分为姜黄素、姜黄酮、二氢姜黄酮、姜烯等。现代研究表明姜黄具有降血脂、利胆、抗肿瘤、抗炎、抗病原微生物等作用。

[0014] 车前子为车前科植物车前Plantago asiatica L.或平车前Plantago depressa Willd.的干燥成熟种子。用于热淋涩痛，水肿胀满，具有清热利尿通淋、渗湿止泻、明目、祛痰的作用。其所含主要成分为月桃叶珊瑚甙、车前粘多糖、都桷子甙酸、车前子酸、琥珀酸等。现代研究表明车前子具有利尿、保护关节囊、抗炎等作用。

[0015] 甘草为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、胀果甘草Glycyrrhiza inflata Bat.或光果甘草Glycyrrhiza glabra L.的干燥根和根茎。用于脾胃虚弱，倦怠乏力，具有补脾和胃，益气复脉的作用。其所含主要成分为甘草甜素、乌拉尔甘草皂甙、甘草皂甙、新西兰牡荆甙-Ⅱ、水仙甙等。现代研究表明甘草具有肾上腺皮质激素样作用、解毒、止咳平喘、调节机体免疫功能等作用。

[0016] 地肤子为藜科植物地肤Kochia scoparia(L.)Schrad.的干燥成熟果实。用于小便涩痛，阴痒带下，具有清热利湿，祛风止痒的作用。其所含主要成分为齐墩果酸、正三十烷醇、20-羟基蜕皮素等。现代研究表明地肤子具有抑菌、抗过敏等作用。

[0017] 瞿麦为石竹科植物瞿麦Dianthus superbus L.或石竹Dianthus chinensis L.的干燥地上部分。用于小便不通，淋沥涩痛，具有利尿通淋、活血通经的作用。其所含主要成分为花色甙、瞿麦吡喃酮甙等。现代研究表明瞿麦具有利尿、调节肠管、心脏抑制等作用。[0018] 小茴香为伞形科植物茴香Foeniculum vulgare Mill.的干燥成熟果实。用于寒疝腹痛，睾丸偏坠，具有散寒止痛，理气和胃的作用。其所含主要成分为反式-茴香脑、柠檬烯、小茴香酮等。现代研究表明小茴香具有调节胃肠运动、抗溃疡、利胆等作用。

[0019] 其中，它是以原料药的药粉、水提物或/和有机溶剂提取物为活性成分，加上药学上常用的辅料或/和辅助性成分制备而成的剂型。

[0020] 本发明所述药学上可接受的辅料，是指除活性成分以外包含在剂型中的物质，包括但不仅限于填充剂(稀释剂)、润滑剂(助流剂或抗粘着剂)、分散剂、湿润剂、粘合剂、调节剂、增溶剂、抗氧剂、抑菌剂、乳化剂、崩解剂等。粘合剂包含糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨醇、黄芪胶、纤维素及其衍生物(如微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素或羟丙甲基纤维素等)、明胶浆、糖浆、淀粉浆或聚乙烯吡咯烷酮等；填充剂包含乳糖、糖粉、糊精、淀粉及其衍生物、纤维素及其衍生物、无机钙盐(如硫酸钙、磷酸钙、磷酸氢钙、沉降碳酸钙等)、山梨醇或甘氨酸等；润滑剂包含微粉硅胶、硬脂酸镁、滑石粉、氢氧化铝、硼酸、氢化植物油、聚乙二醇等；崩解剂包含淀粉及其衍生物(如羧甲基淀粉钠、淀粉乙醇酸钠、预胶化淀粉、改良淀粉、羟丙基淀粉、玉米淀粉等)、聚乙烯吡咯烷酮或微晶纤维素等；湿润剂包含十二烷基硫酸钠、水或醇等；抗氧剂包含亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、二丁基苯酸等；抑菌剂包含0.5％苯酚、0.3％甲酚、0.5％三氯叔丁醇等；调节剂包含盐酸、枸橼酸、氢氧化钾(钠)、枸橼酸钠及缓冲剂(包括磷酸二氢钠和磷酸氢二钠)等；乳化剂包含聚山梨酯-80、没酸山梨坦、普流罗尼克F-68，卵磷酯、豆磷脂等；增溶剂包含吐温-80、胆汁、甘油等。[0021] 所述药学上可接受的辅助性成分，它具有一定生理活性，但该成分的加入不会改变上述化合物或衍生物在疾病治疗过程中的主导地位，而仅仅发挥辅助功效，这些辅助功效仅仅是对该成分已知活性的利用，是医药领域惯用的辅助治疗方式。若将上述辅助性成分与本发明化合物配合使用，仍然应属于本发明保护的范围。

[0022] 在实际生产或使用过程中，可采用水或/和有机溶剂进行提取，均能够提取得到有效成分，当然，若直接将药材打粉后，亦可使用，而药粉中各有效成分并未经过提取，多数成分可能仍然保留在细胞内，因此，以药粉方式入药，其起效时间可能会延长，但仍然具备相应的治疗活性，但是，若采用超微粉碎技术，可以在粉碎的同时，达到破壁效应，提高了药粉直接入药的生物利用度。

[0023] 其中，所述有机溶剂选自乙醇、含水乙醇、丙酮、甲醇、含水甲醇、正丁醇、含水正丁醇或乙酸乙酯。

[0024] 进一步地，所述有机溶剂选自乙醇或含水乙醇。

[0025] 更进一步地，所述含水乙醇选自50～90％v/v乙醇。

[0026] 优选地，所述含水乙醇选自65～85％v/v乙醇。

[0027] 进一步地，所述剂型为经胃肠道吸收剂型。

[0028] 本发明还提供了上述药物组合物的制备方法，它包括如下操作步骤：

[0029] (1)按配比称取原料药；

[0030] (2)取各原料药，合并水提，所得水提物备用；或者，取各原料药，分别水提，所得各药材水提物备用；

[0031] (3)将水提物加上药学上常用的辅料或/和辅助性成分制剂，即可。

[0032] 进一步地，步骤(2)中，提取方法为煎煮或超声。

[0033] 本发明还提供了上述组合物在制备治疗或辅助治疗泌尿系统结石的保健品或药物中的用途。

[0034] 进一步地，所述泌尿系统结石为肾结石、膀胱结石或尿路结石。

[0035] 更进一步地，所述保健品或药物是改善肾结石引起的腰部、上腹部疼痛、及血尿的保健品或药物。

[0036] 本发明将金钱草等9味药材组方使用后，在使用与单味药相当或更低剂量的情况下，对结石的排出效果显著优于单味药材，证明本发明9味药材组合后发挥了协同增效作用；试验表明，本发明药物组合物，具有降低组织结石数量，减少组织草酸含量，抑制草酸钙结晶形成和堆积，使结晶松散，变小，变碎，易随尿排出的作用，进而有效改善结石病引起的肾、膀胱、尿道部位的疼痛及血尿等症状，减少对组织器官的损伤，从而保护组织器官。其配伍精当，药效明确，且无毒副作用，安全性高，为临床用药提供了新的选择。

[0037] 下面结合具体实施方式对本发明作进一步的详细描述。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明内容所实现的技术均属于本发明的范围。

具体实施方式

[0038] 实施例1

[0039] 将金钱草15kg、海金沙10kg、大黄15kg、姜黄6kg、车前子25kg、甘草5kg、地肤子20kg、瞿麦20kg、小茴香5kg切片或切段，洗净，加3倍量75％乙醇浸泡4小时，然后再添加5倍量75％乙醇加热煮沸2小时过滤取滤液，滤渣再加6倍量75％乙醇加热煮沸1.5小时后过滤取滤液，合并两次滤液减压浓缩(密度为0.24-0.46g/ml)、喷雾干燥得到干燥浸膏粉，干粉得率为24.2％。

[0040] 取浸膏粉，加入适量淀粉，制备颗粒剂。

[0041] 实施例2

[0042] 将金钱草5kg、海金沙5kg、大黄10kg、姜黄2kg、车前子15kg、甘草5kg、地肤子10kg、瞿麦10kg、小茴香2kg切片或切段，洗净，加3倍量75％乙醇浸泡4小时，然后再添加5倍量75％乙醇加热煮沸2小时过滤取滤液，滤渣再加6倍量75％乙醇加热煮沸1.5小时后过滤取滤液，合并两次滤液减压浓缩(密度0.24-0.46g/ml)、喷雾干燥得到干燥浸膏粉，干粉得率为22.3％。

[0043] 取浸膏粉，加适量淀粉和糊精，制粒，压片，即得片剂。

[0044] 实施例3

[0045] 将金钱草20kg、海金沙20kg、大黄30kg、姜黄10kg、车前子35kg、甘草10kg、地肤子30kg、瞿麦35kg、小茴香10kg切片或切段，洗净，加3倍量75％乙醇浸泡4小时，然后再添加5倍量75％乙醇加热煮沸2小时过滤取滤液，滤渣再加6倍量75％乙醇加热煮沸1.5小时后过滤取滤液，合并两次滤液减压浓缩(密度0.24-0.46g/ml)、喷雾干燥得到干燥浸膏粉，干粉得率为25.1％。

[0046] 取浸膏粉，加适量微晶纤维素，混合，干燥，装胶囊，即得胶囊剂，每粒胶囊中含浸膏粉0.5g。

[0047] 实施例4

[0048] 将金钱草13kg、海金沙10kg、大黄14kg、姜黄6kg、车前子25kg、甘草7kg、地肤子17kg、瞿麦19kg、小茴香4kg切片或切段，洗净，加水煎煮3次，过滤，合并滤液，减压浓缩、喷雾干燥，即得干燥浸膏粉。

[0049] 取浸膏粉，加适量淀粉、蜂蜜，制备丸剂。

[0050] 实施例5

[0051] 将金钱草13kg、海金沙10kg、大黄14kg、姜黄6kg、车前子25kg、甘草7kg、地肤子17kg、瞿麦19kg、小茴香4kg切片或切段，洗净，先加85％乙醇回流提取2次，合并醇提液；药渣加水煎煮2次，合并水煎液；取醇提液，回收乙醇后，与水煎液合并，浓缩至稠膏，加入适量辅料，灌装，即得。

[0052] 以下通过试验例具体说明本发明的有益效果，均采用实验例3所制备的药物剂型。

[0053] 试验例1临床统计

[0054] 前期共收治200例肾结石患者，均患有如下病症：肾部有结石，腰部、上腹部疼痛，

以及出现血尿。使用本发明组合物(实施例3制备的胶囊剂)，每次2-3粒，每天2-3次，连续服用4周以上，各患者反馈调查报告见下表：

[0055] 其中A治愈：结石被排出，无残留；疼痛症状消失；无血尿。

[0056] B好转：结石减少；疼痛症状减轻；基本不出现血尿。

[0057] C无效：结石无变化；疼痛症状无改善；仍出现血尿。

[0058]

效果人数四周五周六周七周及以上总有效率

A治愈1338226151066.5％

B好转46178332％

C无效330000

合计20013143231398.5％

[0059] 总有效率达98.5％。

[0060] 经典案例：

[0061] 1.杨先生，54岁，患肾结石。连续服用本发明组合物2周后，肾部疼痛明显减轻，持续用药5周后，疼痛消失，经检查结石无残留。

[0062] 2.李女士，48岁，患肾结石。连续服用本发明组合物2周后，腰部疼痛明显减轻，持续用药4周后，疼痛消失，经检查结石减少，持续用药6周后，经检查无结石残留。[0063] 3.高女士，42岁，因多年繁忙工作患双肾结石带严重积水以及输尿管结石。连续服用本发明组合物3周后，肾部疼痛明显减轻，排尿畅通，持续用药5周后，疼痛消失，经检查结石减少，积水消失，持续用药8周后，经检查无结石残留。

[00] 试验例2动物药效学实验

[0065] 1、本发明组合物的改善肾部结石作用

[0066] (1)药物：本发明药物组合物按实施例3方法提取得到，按所需剂量以干浸膏粉制备试验用药；

[0067] (2)实验分组与剂量设计：随机挑选180±20g健康大鼠20只作为正常组，其余大鼠接受1.25％乙二醇和1％氯化铵制备大鼠肾结石模型造模，造模第13天挑选患肾结石明显的大鼠100只进行分组，每组20只，随机分为5组：模型组、枸橼酸钾组、本发明组合物低剂量组、本发明组合物中剂量组、本发明组合物高剂量组。

[0068] 造模方法：每天每只大鼠给予1.25％乙二醇和1％氯化铵混合溶液10ml，自由摄取，连续给药12天。

[0069] (3)给药时间及方法：两周后开始按体重灌胃给药，一日一次，连续给药28天后处死全部老鼠。同时，空白对照组和模型组小鼠灌服等容积生理盐水。

[0070] (4)尿中草酸钙结晶检测：28天后同期接取尿液，涂片观察尿中草酸钙结晶，每张涂片取5个高倍视野，取平均值评估。判定标准:(-):高倍视野中未见草酸钙结晶；(<+):0～10/HP；(+):10～20/HP；(++):20～30/HP；(+++):>30/HP。

[0071]

[0072] 实验结果显示，本发明组合物高、中、低剂量组尿中草酸钙结晶排泄明显高于模型组，略高于枸橼酸钾组。说明本发明组合物能促进草酸钙结晶随尿排出，减少体内草酸钙结晶的堆积，能预防和改善结石症。

[0073] (5)计数右肾草酸钙结晶数量：取右肾1/3组织固定后常规切片染色,普通光学显微镜下观察,每张切片观察5个高倍视野计数草酸钙结晶数量,得平均值。取右肾2/3组织称重后，加入1mol/L HCl10ml浸泡4h后用内切式组织匀浆器制备组织匀浆，3000r/ min离心20min，取上清液用变色酸比色法测草酸含量。

[0074]

组别n肾草酸钙结晶(颗/HP)肾草酸含量(mmol/L)

模型组2045.4±28.70.86±0.21

枸橼酸钾组2020.6±10.7*0.42±0.19*

本发明组合物低剂量组2019.3±9.8*0.36±0.12*

本发明组合物中剂量组2015.9±8.4**0.30±0.15**

本发明组合物高剂量组2011.1±5.9**0.27±0.09**

[0075] 注：*与模型组比较P<0.05，**与模型组比较P<0.01

[0076] 实验结果显示，本发明组合物低、中、高剂量均能有效降低肾组织结石数量，减少肾组织草酸含量，其中本组合物中、高剂量组疗效较枸橼酸钾效果好。说明本发明组合物能通过减少肾组织草酸含量，抑制草酸钙结晶形成和堆积，使结晶松散，易从尿中排出，进而有效改善肾部结石。

[0077] 2、本发明组合物与中国专利201010224038.9作用比较

[0078] (1)药物：本发明药物组合物按实施例3方法制得的胶囊内容物制备试验用药；中国专利201010224038.9的优选配方组按专利所述制备方法所制得的胶囊内容物制备试验用药。用无菌水配制试验用药。

[0079] (2)实验分组与剂量设计：随机挑选体重为180±20g健康大鼠20只作为正常组，其余大鼠接受1.25％乙二醇和1％氯化铵制备大鼠肾结石模型造模，造模第13天挑选患肾结石明显的大鼠60只进行分组，每组20只，随机分为3组：模型组、本发明组合物中剂量组、优选配方组。

[0080] 造模方法：每天每只大鼠给予1.25％乙二醇和1％氯化铵混合溶液10ml，自由摄取，连续给药12天。

[0081] (3)给药时间及方法：两周后开始按体重分别灌胃给药。本发明组合物组给药剂量为2g/kg(剂量以胶囊内容物重量计)，相当于含生药8g/kg。优选配方组给药剂量为10g/ kg(剂量以胶囊内容物重量计)，相当于含生药10g/kg。一日一次，连续给药28天后处死全部老鼠。同时，空白对照组和模型组小鼠灌服等容积生理盐水。

[0082] (4)尿中草酸钙结晶检测：28天后同期接取尿液，涂片观察尿中草酸钙结晶，每张涂片取5个高倍视野，取平均值评估。判定标准:(-):高倍视野中未见草酸钙结晶；(<+):0～10/HP；(+):10～20/HP；(++):20～30/HP；(+++):>30/HP。

[0083]

[0084] 实验结果显示，灌胃本发明组合物大鼠尿检有结晶的概率为100％，而优选配方组尿检有结晶的概率为75％，说明本发明组合物能促进草酸钙结晶随尿排出，减少体内草酸钙结晶的堆积，能预防和改善结石症。

[0085] (5)计数右肾草酸钙结晶数量：取右肾1/3组织固定后常规切片染色,普通光学显微镜下观察,每张切片观察5个高倍视野计数草酸钙结晶数量,得平均值。取右肾2/3组织称重后，加入1mol/L HCl10ml浸泡4h后用内切式组织匀浆器制备组织匀浆，3000r/ min离心20min，取上清液用变色酸比色法测草酸含量。

[0086]

组别n肾草酸钙结晶(颗/HP)肾草酸含量(mmol/L)

模型组2047.3±23.10.84±0.19

本发明组合物组2015.2±7.0**0.29±0.08**

优选配方组2030.7±5.60.49±0.23

[0087] 注：*与模型组比较P<0.05，**与模型组比较P<0.01

[0088] 实验结果显示，本发明组合物相对优选配方组，能有效降低肾组织结石数量，减少肾组织草酸含量。说明本发明组合物效果好于中国专利201010224038.9的优选配方组；并且，本发明药味极少，使用量更低，较大幅度地降低了用药成本，为患者带来了福音。[00] 试验例3急性毒性实验

[0090] 取金钱草13kg、海金沙10kg、大黄14kg、姜黄6kg、车前子25kg、甘草7kg、地肤子17kg、瞿麦19kg、小茴香4kg切片或切段，洗净，以水为提取溶剂进行提取。提取方法为：首先加3倍量提取溶剂浸泡4小时，然后再添加5倍量提取溶剂加热煮沸2小时过滤取滤液，滤渣再加6倍量提取溶剂加热煮沸1.5小时后过滤取滤液，合并两次滤液减压浓缩，喷雾干燥得到干燥浸膏粉。

[0091] 用最大耐受量(MTD)法进行小鼠急性毒性试验，选用健康小鼠20只，雌、雄各10只，检疫3d，体重为18.2～21.8g。实验前动物禁食16h，自由饮水。受试样品浅棕色干燥原粉，按3.4g/kg(剂量以干浸膏粉重量计)体重一次性灌胃，第一次灌胃后间隔8小时进行第二次灌胃。受试样品急性毒性给予剂量为3.4g/kg体重，相当于人体推荐剂量的100倍。连续观察14d，记录中毒表现及死亡情况。实验观察期间，本发明组合物对小鼠体重无明显影响。各组动物饮食和活动正常，生长良好，未见任何中毒表现，无死亡。因此，本发明组合物的雌、雄性小鼠急性经口MTD＞1.92g/kg体重，属无毒类。

[0092] 试验例4长期毒性试验

[0093] 取金钱草13kg、海金沙10kg、大黄14kg、姜黄6kg、车前子25kg、甘草7kg、地肤子17kg、瞿麦19kg、小茴香4kg切片或切段，洗净，分别以水、乙醇、丙酮、甲醇、正丁醇、乙酸乙酯为提取溶剂进行提取。提取方法为：首先加3倍量提取溶剂浸泡4小时，然后再添加5倍量提取溶剂加热煮沸2小时过滤取滤液，滤渣再加6倍量提取溶剂加热煮沸1.5小时后过滤取滤液，合并两次滤液减压浓缩，喷雾干燥得到干燥浸膏粉。

[0094] 选用清洁级SD健康大鼠80只，动物购买后，在本动物房内检疫室检疫3d。本发明组合物的人体推荐剂量为2g/d(以60kg体重计，剂量以干浸膏粉重量计)，根据人体推荐剂量的30、60和100倍设1.00，2.00，3.34g/kg体重三个剂量组，另设一个阴性对照组，每组20只，雌、雄各半。受试样品为浅棕色干燥粉末，用无菌水配制成溶液灌胃，每天两次。对照组用无菌水代替受试样品，按0.96g/kg体重连续灌胃30d。动物单笼饲养，自由进食饮水，每周称1次体重和2次食物摄入量，计算每周及总的食物利用率，每天观察动物一般情况、有无中毒表现和死亡。实验结束后观察：体重、食物利用率、血液学指标、各脏器绝对重量和相对重量(脏器重/体重)、各脏器病理学检查。

[0095] 结果表明本发明组合物对实验动物体重、食物利用率、血液生化指标、脏器重量等指标均无明显影响。经过病理检查，未见实验动物内脏有明显病理变化。

[0096] 本发明通过长期试验发现，将金钱草、海金沙等9味药材配伍使用后，发挥了协同增效作用，能够有效改善或治疗结石病，其药效活性显著优于单味药材，同时，本发明组合物无毒副作用，安全性良好。下载本文