1 M Tris-HCl,pH 7.4,7.6,8.0
1. 称取121.1 g Tris,置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 待溶液冷却至室温后,按下表量加入浓盐酸调节所需pH值。
pH值 浓HCl
7.4 约70 ml
7.6 约60 ml
8.0 约42 ml
4. 用去离子水定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
1.5 M Tris-HCl,pH 8.8
1. 称取181.7 g Tris,置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 待溶液冷却至室温后,用浓盐酸调节pH值至8.8。
4. 用去离子水定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
0.5 M EDTA,pH 8.0
1. 称取186.1 g Na2EDTA•2H2O,置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 用NaOH调节pH值至8.0(约20 g NaOH)。
注意:pH值至8.0时,
常用抗生素的配制
| 抗生素 | 储存浓度(mg/ml) | 工作浓度 (µg/ml) | |
| 松弛型质粒 | 严紧型质粒 | ||
| Ampicillin (Amp) | 50-100 (溶于H2O) | 60-200 | 20 |
| Carbenicillin (Cab) | 50-100 (溶于H2O) | 60-200 | 20 |
| Chloramphenicol (Cm) | 34 (溶于EtOH) | 170 | 25 |
| Kanamicin (Kan) | 50 (溶于H2O) | 50 | 10 |
| Neomycin (Neo) | 25(溶于H2O) | 50 | 10 |
| Streptomicin (Sm) | 50 (溶于H2O) | 50 | 10 |
| Tetracycline (Tet) | 5 -10 (溶于70%EtOH) | 50 | 10 |
| G418 | 50 (溶于 H2O或100 mM HEPES,pH 7.3) | 50-1000 | 50 |
| 琼脂糖浓度(%) | 线性DNA片段大小 | |
| 标准(高熔点)琼脂糖 | 低熔点琼脂糖 | |
| 0.5 | 700 bp ~ 25 kb | |
| 0.8 | 500 bp ~ 15 kb | 800 bp ~ 10 kb |
| 1.0 | 250 bp ~ 12 kb | 400 bp ~ 8 kb |
| 1.2 | 150 bp ~ 6 kb | 300 bp ~ 7 kb |
| 1.5 | 80 bp ~ 6 kb | 200 bp ~ 4 kb |
| 2.0 | 50 bp ~ 2 kb | 100 bp ~ 3 kb |
| 3.0 | 500 bp ~ 1 kb | |