蛋白激酶、乙酰化、地贫表型、转化、转导、转染、复制起点、复制中各成分作用、病毒变异大的原因、阮病毒、质粒载体的三个位点、转录元件

1、        基因         是遗传的基本单位。

2、模板链也叫  反义链     ，编码链=有义链

3、基因组（Genome） 指一套完整单倍体的遗传物质的总和。包括  核染色体基因组 和  线粒体基因组。

4、人类基因组，3X109bp，约编码    3万  个基因

5、序列变异：  插入、缺失、突变、SNPs

6、DNA的复制是单向或双向进行的。普遍的情况是    半不连续复制     

7、基因表达一般包括    转录和翻译      两个部分的内容

8、原核生物RNA聚合酶全酶包括   α2ββ`  σ                         

9、σ 因子     的作用是识别启动子元件

10、聚合酶有三种，I和III分别负责rRNA 和tRNA 的转录， RNA 聚合酶II负责mRNA的转录

11、蛋白质翻译的模板是      成熟mRNA    

12、mRNA 上的密码具有   方向性、连续性、兼并性、核通用性

13、在       氨基酰tRNA合成酶             的催化下，tRNA和 相应的氨基酸结合，通过密码子-反密码子互补准确将氨基酸加到延伸的肽链。

14、分子伴侣的作用是    防止和消除错误折叠    

15、分子伴侣：热休克蛋白           &     伴侣素    

16、信号肽与其它相关蛋白的功能在于    将新生的肽链锚定于内质网      

17、泛素化“贴标签”过程涉及3种酶： 泛素活化酶、泛素偶连酶、泛素-蛋白连接酶       

18、可调节基因（inducible gene）包括  诱导表达         和   阻遏表达      两种方式。

19、大肠杆菌乳糖操纵子含      Z、Y、A       三个结构基因，分别编码    半乳糖苷酶、透明酶 和 乙酰基转移酶        ， 此外还有一个操纵序列O，一个 启动子P   和一个调节基因    

20、RNA加工和修饰： 加帽、 加尾、  去除内含子       ，剪接有组织特异性

21、细胞通讯方式：    间隙连接、   膜表面分子接触  、   化学信号             

22、受体的特点： 特异性； 高度亲和性；   可逆性；  可饱和性；  特定的作用模式

23、细胞内受体-甾醇类激素，包括  糖皮质激素、盐皮质激素、性激素和甲状腺     受体

24、信号转导的基本规律：信号的发生和终止都是迅速的    、 级联放大     、通用性和特异性     、交叉联系      

25、细胞周期：      G1、S、G2、M     

26、细胞周期M期检查主要是由   纺锤丝      检查来完成

27★  凋亡     和      坏死     是细胞死亡的两种方式

28、细胞凋亡可以由两种完全不同的方式  内源性途径 和 外源性途径

29★分子杂交的基本方法：   Southern 印迹法     Northern 印迹法    Western 印迹法  斑点印迹杂交 、原位杂交、液相杂交

30、原位杂交的类型：       DNA-DNA、DNA-RNA、RNA-RNA杂交       

31、探针的种类：   cDNA 探针、 基因组DNA探针、   寡核苷酸探针、    RNA探针         32、核素标记物（同位素标记）：  32P、35S、3H    ；  非核素标记物（非同位素标记）：             生物素、地高辛、荧光素等

33、基因组大小     30亿          碱基

34、基因芯片的特点：   高通量、微型化、自动化、低成本、高度并行     

35、PCR反应体系一般含有：DNA模板 、,Taq DNA聚合酶  、 寡核苷酸引物  、  Mg2+   、4种dNTP     及    缓冲液。

36、PCR三个阶段：        高温变性 、低温退火 和   中温延伸          

37、PCR反应的特点：特异性强、灵敏度高、简便快速、对标本的纯度要求低、用途广泛

38、遗传工程广义包括细胞水平上的遗传操作（细胞工程）和分子水平上的操作，即重组DNA技术（基因工程） 

39、基因重组所必需的元素:           目的基因、   载体、  工具酶、   宿主细胞        

干扰现象(interference)：  两种病毒同时感染同一细胞时，可发生一种病毒的增殖抑制另一种病毒复制的现象，即干扰现象。

41、载体按功能 分类 克隆载体    （目的基因拷贝 ）；  表达载体      （基因表达产物 

42★常用的载体有      质粒、   噬菌体      和     病毒载体

43、噬菌体（phage）是感染细菌的一类    病毒     

44、工具酶一般分四类：   核酸酶（切割和裂解）、   连接酶、   聚合酶、  修饰酶    

45、性核酸内切酶识别和切割的三种情况： 产生5’粘性末端   产生3’粘性末端、产生平末端

46、目的基因与载体的连接，主要靠  DNA连接酶   和   双链DNA粘末端单链序列    互补结合的配合使用

47、感受态细胞的制备：        冷Cacl2          处理

48、最常见的载体携带的标志是       抗药性标志       ，如    抗氨芐青霉素（ampr）、抗四环素(terr)、    抗卡那霉素(kanr)   等

49、在分子克隆的所有操作中，最基本的操作是    核酸的分离与纯化 。  其关键步骤是去蛋白质    

50、应用最广的核酸浓缩法是     乙醇沉淀法       

51、核酸的最大吸收波长是     260nm    ，吸收低谷在    230nm

52、干扰素种类：     α-IFN、β-IFN、γ-IFN     

53、所谓转基因动物就是指以实验方法将   外源基因    导入动物   染色体基因组     内稳定整合并能遗传给后代的一类动物。

54、转基因的方法:    显微注射法       、    体细胞核移植方法   、逆转录病毒感染法    、   胚胎干细胞法     

6、 如果用性内切酶切割双链DNA产生5’突出的粘性末端，则可以用T4噬菌体DNA聚合酶进行3’端标记。如果用性内切酶切割DNA产生的是3’突出的粘性末端，则可以用DNA多核苷酸激酶进行5’端标记。

7、 1982年，英国的《自然》杂志发表了一篇文章：有两个美国实验小组利用转基因技术，将大鼠生长激素重组基因导入小鼠受精卵中，培育出具快速生长效应的“转基因超级鼠”。转基因鼠比与他同胎所生的小鼠生长速度快2-3倍，体积大一倍。

8、       原位杂交     使用核酸探针检测细胞和组织中特异核苷酸序列的位置。

 9、突变类型：点突变、  缺失、   插入、    倒位

10、DNA损伤的修复：   ①光修复；   ②切除修复；    ③重组修复；        ④SOS修复。

★11、世界三大核酸序列数据库：基因组数据库、蛋白质序列数据库、蛋白质结构数据库

世界三大主要核酸序列数据库

答：EMBL（欧洲）、GenBank（美国）和DDBJ（日本）

12、原核生物的启动子的四个保守区域为 转录起始点 、  -10区  、  -35区 、  -10区与-35区的距离   。

13、根据对DNA序列和蛋白质因子的要求，可以把重组分为  同源重组  、  位点专一性重组/特异位点重组   、 转座重组  、异常重组 四类。

14、研究启动子功能的主要方法是   启动子的突变  ，研究酶与启动子间识别与结合的方法有  足迹法  和  碱基修饰法  。

15、真核生物中反式作用因子的DNA结合结构域有  螺旋－转角－螺旋(HTH)   、碱性－螺旋-环-螺旋(bHLH) 、锌指(zinc finger)    、  碱性－亮氨酸拉链(bZIP)。

16、根据 DNA复性动力学，DNA序列可以分成哪四种类型？

  单一序列 、轻度重复序列、 中度重复序列、 高度重复序列    

1．蛋白质的生物合成是以mRNA为模板，以氨酰-tRNA为原料直接供体，以核糖体为合成杨所。

2．生物界共有个密码子，其中61个为氨基酸编码，起始密码子为AUG；终止密码子为UAA  UAG  UGA。

3．原核生物的起始tRNA以tRNAf表示，真核生物的起始tRNA以tRNAi表示，延伸中的甲硫氨酰tRNA以tRNAm表示。

4．植物细胞中蛋白质生物合成可在核糖体、线粒体和叶绿体三种细胞器内进行。 

5．延长因子T由Tu和Ts两个亚基组成，Tu为对热不稳定蛋白质，Ts为对热稳定蛋白质。

6．原核生物中的释放因子有三种，其中RF-1识别终止密码子UAA、UAG；RF-2识别UAA、UGA；真核中的释放因子只有RF一种。        

7．氨酰-tRNA合成酶对氨基酸和相应的tRNA有高度的选择性。

8．原核细胞的起始氨基酸是甲酰甲硫氨酸，起始氨酰-tRNA是甲酰甲硫氨酰-tRNA。  

9．原核细胞核糖体的小亚基上的16SrRNA协助辨认起始密码子。  

l0．每形成一个肽键要消耗4个高能磷酸键，但在合成起始时还需多消耗1个高能磷酸键。

11．肽基转移酶在蛋白质生物合成中的作用是催化肽键形成和肽酰-tRNA的水解。  

12．肽链合成终止时，终止因子进人“A”位，识别出终止密码子，同时终止因子使肽基转移酶的催化作用转变为水解作用。      

13．原核生物的核糖体由30S小亚基和50S大亚基组成，真核生物核糖体由40S小亚基和60S大亚基组成。      

14. 蛋白质中可进行磷酸化修饰的氨基酸残基主要为Ser、Thr、Tyr。   

15. 同一氨基酸具有多个密码子，编码同一氨基酸的密码子称为同义密码。

16. 蛋白质的跨膜需要信号肽的引导，蛋白伴侣的作用是辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质。

17. 信号识别颗粒（SRP）可以分为信号识别结构域和延伸作用制动结构域两个结构域，其主要作用为在翻译过程中它能够识别信号序列，指导核糖体到转运通道。

18、高等哺乳动物和大肠杆菌的基因中使用相同的终止密码子UAG和UGA。人类线粒体基因使用的终止密码子为UAA、UAG、AGA和AGG。

19、开放的阅读框是指新测DNA序列中，由计算机辨认出的可能编码区域，它是从起始密码子起到终止密码子止的一段连续的密码子区域。

20. tRNA的反密码子为UGC,它识别的密码子为ACG。

21. 新生肽链每增加一个氨基酸单位都需要经过进位,转肽,移位三步反应,其中，在进位和移位反应中各需要一分子的GTP提供能量。下载本文