方案编号：

版本号：B

验证部门：品质部/技术部/制造部

方案制定人/日期：

方案审核人/日期：

1．概述

2．验证目的

3．职责与验证申请

4．验证依据

5．验证计划

6．验证内容

清洁、消毒验证方案

1.概述

1.1物料、洁净服的清洁及运输至其它车间（透析器车间、穿刺针车间、透析器护理包车间、注塑车间、装配车间）、洁净区消毒方法、消毒剂对地面、空气、墙面及设备外壁、工装、工位器具、人员手清洗及消毒，旨在控制微生物污染和不溶性微粒污染，防止微生物及不溶性微粒在产品生产环境中污染的必要手段。此验证通过科学的方法采集足够的数据，以证明清洁、消毒方法、消毒剂消毒效果的可靠性，并作为使用该清洁、消毒方法、消毒剂更换的依据。

1.2本公司车间洁净区分为三十万级、十万级、万级，局部百级。按照相关作业指导书进行清洁、消毒，洁净车间统一采用75%乙醇和0.1%新洁尔、消毒工作台、设备表面、运输带表面。人员手消毒剂采用双氧水、新洁尔灭、及75%乙醇消毒，消毒剂交替使用。空气消毒用臭氧与甲醛熏蒸交替消毒，本次验证选择A栋三楼装配与挤出十万级洁净车间作为验证对象，此次验证旨在确认消毒剂按照规定的消毒程序消毒后，能否在达到消毒效果，并在有效期内符合工艺要求。将所得结果与可接受限度比较，符合可接受标准，则可证实消毒方法、消毒剂选择的有效性及可靠性。

2. 验证目的

确认各洁净级别的操作间空气及设备外表面，工作台、人员手、物料、洁净服等按照规定的清洁、消毒程序清洁、消毒后能够达到清洁、防止污染的目的，并在消毒有效期内能确保达到生产工艺所需要的效果。

3.职责与验证申请

3.1品质部提供检测项目方案、接收标准、评价等级及相关实验

3.2制造部负责配合品质部按该验证方案对车间清洁、消毒效果的验证

清洁、消毒效果验证申请表

6.1适用于车间洁净区天花板、墙面、地面输送带、工作台、物料车、货架、生产设备表面、工装、工位器具等物体表面、空气、人员手、清洁、消毒效果及周期：细菌总数的检测及消毒后材质情况及微生物污染情况；

6.2物料净化效果、洁净工作服清洗、消毒效果、运输至其它楼层的验证：物料净化后并组装成成品不溶性微粒及初始菌污染情况（此次实验选择血路管作为评价对象）。

6.3可接受标准

1）物体表面细菌总数可接受标准

三十万级≤15cfu/皿

十万级≤10 cfu /皿

万级菌落总数≤3 cfu /皿

万级局部百级≤1 cfu /皿

2）人员手细菌总数可接受标准

手指菌≤10 cfu /皿

3）洁净环境沉降菌可接受标准

三十万≤15 cfu /皿

十万级≤10 cfu /皿

万级≤3 cfu /皿

万级局部百级≤1 cfu /皿

4）细菌挑战试验

枯草芽孢杆菌生物指示剂（106 个）：消毒后无菌生长或者细菌数量≤1000个

5）物料净化后组装成成品后不溶性微粒数15-25um的微粒应不大于1.0个/cm2，大于25um的微粒数应不超过0.5个/ cm2,内表面细菌总数应不大于10个/皿。

6）洁净工作服清洗消毒后放放带带桶中，并运输至各洁净车间，其外观应符合要求，物体表面细菌总数应符合相应洁净度级别要求。

6.4取样方法及频率

6.4.1物体表面和人员手细菌总数取样

装配车间洁净区十万级抽取2个房间，选择房间的墙面、地面、设备表面以及操作台，运输带不同部位各取两点作为取样点（以最难消毒处为抽样原则）。为对比消毒前后效果，在消毒前后分别取样。

a.物体表面：确定需要擦拭的表面的面积（5cm×5cm）， 用浸有灭菌生理盐水的棉拭子在规定区域内涂抹10次，（往返算1次），将棉拭子放入10ml灭菌生理盐水的试管中。

b.人员手：被检人员五指并扰，将浸有灭菌生理盐水的棉拭子在右手指曲面，从指尖、甲沟至指根处往返涂抹10次，将棉拭子放入10ml灭菌生理盐水的试管中。消毒后1小时、2小时、3小时分别取样

c.将试管震荡混匀后分别取1ml放于灭菌平皿内按要求进行培养后计数。       

6.4.2洁净环境沉降菌取样方法：沉降菌检测按《无菌医疗器具洁净室环境、压缩空气、人员卫生要求及测试作业指导书作业指导》进行。

6.4.3 细菌挑战性试验取样方法：消毒前按照房间大小确定生物指示剂枯草芽孢杆菌纸片的数量，将其放到打开的平皿中，消毒后关闭平皿将总菌片数分成两份，一份用于菌落数的检测，一份用于无菌检查，见表5。

6.4.4物料净化效果：取粒料及配件各5包按物料净化要求净化后组装成成对成品内表面进行试验。

6.4.5洁净工作服清洗消毒后按不同级别各取5套衣服进行试验。

6.5实验方法

6.5.1物体表面和人员手细菌总数、洁净环境沉降菌实验方法按《无菌医疗器具洁净室环境、压缩空气、人员卫生要求及测试作业指导书作业指导》进行。

6.5.2挑战性实验方法

A. 75%乙醇挑战性实验：将10片枯草芽孢菌片分别浸泡于装有10ml75%乙醇的10支试管中密闭2分钟，然后将其5片无菌检查，5片做菌落检测。

B.0.1%新洁而灭及3%双氧水挑战性实验：试验方法同75%乙醇。

C.10ml甲醛溶液挑战性实验（36﹪）：2g高锰酸钾熏蒸洁净区：根据房间的大小确定枯草芽孢菌片的数量（取10片5个点进行试验），消毒前将菌片放在打开的平皿中，等消毒后关闭平皿一份做无菌检查，一份做菌落数检测。

D.臭氧挑战性实验（浓度10mg/m3 ）：试验方法同甲醛。

6.5.3物料净化效果试验

a.表面细菌总数：按按物体表面细菌总数检测方法进行试验。

b.表面不溶性微粒：取组装成成品的血液净化循环管路5套，按《血液净化装置的体外循环管路成品检验作业指导书》的不溶性微粒方法进行检测。

6.6洁净工作服清洗、消毒效果：外观用目视检查，细菌总数按物体表面细菌总数检测方法进行试验。

清洁、消毒效果验证报告

报告编号：

报告时间：

贝恩医疗设备（广州）有限公司

清洁、消毒效果验证报告

1．目的

2．概述

3．测试方法与试验结果

4．结论

5．重新验证条件

6.附表检测报告

清洁、消毒效果验证报告

1.目的

确认各洁净级别的操作间空气及设备外表面，工作台、人员手、物料、洁净服等按照规定的清洁、消毒、运输程序，其清洁、消毒后能够达到清洁、防止污染的目的，并在消毒有效期内能确保达到生产工艺所需要的效果。

2.概述

本次验证选择装配二车间（十万级洁净车间）作为验证对象，此次验证旨在确认消毒剂按照规定的消毒程序消毒后，能否在达到消毒效果，并在有效期内符合工艺要求。将所得结果与可接受限度比较，符合可接受标准，则可证实消毒方法、消毒剂选择的有效性及可靠性。

3.测试方法与验证结果

3.1取样方法及频率

1）物体表面和人员手细菌总数取样

装配车间洁净区十万级抽取2个房间，选择房间的墙面、地面、设备表面以及操作台，运输带不同部位各取两点作为取样点（以最难消毒处为抽样原则）。为对比消毒前后效果，在消毒前后分别取样。

a.物体表面：确定需要擦拭的表面的面积（5cm×5cm）， 用用浸有灭菌生理盐水的棉拭子在规定区域内涂抹10次，（往返算1次），将棉拭子放入10ml灭菌生理盐水的试管中。

b.人员手：被检人员五指并扰，将浸有灭菌生理盐水的棉拭子在右手指曲面，从指尖、甲沟至指根处往返涂抹10次，将棉拭子放入10ml灭菌生理盐水的试管中。消毒后1小时、2小时、3小时分别取样

c.将试管震荡混匀后分别取1ml放于灭菌平皿内按要求进行培养后计数。       

2）洁净环境沉降菌取样方法：沉降菌检测按《无菌医疗器具洁净室环境、压缩空气、人员卫生要求及测试作业指导书作业指导》进行。

3） 细菌挑战性试验取样方法：消毒前按照房间大小确定生物指示剂枯草芽孢杆菌纸片的数量，将其放到打开的平皿中，消毒后关闭平皿将总菌片数分成两份，一份用于菌落数的检测，一份用于无菌检查，见表5。

4）物料净化效果：取粒料及配件各三包按物料净化要求净化后对内包装袋表面进行试验。

5）洁净工作服清洗消毒后运输至各车间，取运输距离较长的装配三车间、三楼微生物实验室按不同级别各取5套衣服进行试验。

3.2实验方法

3.2.1物体表面和人员手细菌总数、洁净环境沉降菌实验方法按《无菌医疗器具洁净室环境、压缩空气、人员卫生要求及测试作业指导书作业指导》进行。

3.2.2挑战性实验方法

A. 75%乙醇挑战性实验：将5片枯草芽孢菌片分别浸泡于装有10ml75%乙醇的5支试管中密闭2分钟，然后将其2片无菌检查，1片做菌落检测。

B. 0.1%新洁而灭挑战性实验：试验方法同75%乙醇。

C. 10ml甲醛溶液挑战性实验（36﹪）：2g高锰酸钾熏蒸洁净区：根据房间的大小确定枯草芽孢菌片的数量，消毒前将菌片放在打开的平皿中，等消毒后关闭平皿一份做无菌，一份做菌落数检测。

D.臭氧挑战性实验（浓度10mg/m3 ）：试验方法同甲醛。

3.2.3物料净化效果试验

a.表面细菌总数：按按物体表面细菌总数检测方法进行试验。

b.表面不溶性微粒：取组装成成品的血液净化循环管路5套，按《血液净化装置的体外循环管路成品检验作业指导书》的不溶性微粒方法进行检测。

3.2.4洁净工作服清洗、消毒效果：外观用目视检查，细菌总数按物体表面细菌总数检测方法进行。

3.3检验结果

3.3.1物体表面用75%酒精及0.1%新洁尔消毒前后不同部位各取2点，细菌总数检测见表1

表1

                                                表3

 细菌数

3.3.4进入车间前用双氧水消毒后人员手细菌总数检测结果见表4（cfu/皿）                                    

 表4

 细菌数

结论：从表3、表4数据表明用0.1%新洁尔灭及双氧水消毒后，细菌总数达到消毒效果的要求。故可以用以上消毒剂可以用于人员手的消毒，为防止产生抗药性故要求两种消毒剂每月轮换使用。

验证人/日期：                             审核/日期：                     

3.3.5用酒精消毒后人员手细数总数检测结果见表5（cfu/皿）

表5

                                    表6

表7

确认人/日期：                             审核/日期：

3.3.8挑战性试验结果记录表，菌落检查及无菌检查各5片，结果见表8

表8

表9

   检测结果

表10

以上所有检测数据表明：按公司的清洁、消毒方案实施后，其效果符合工艺卫生相关要求,消毒剂更换周期能保证消毒效果达到相关标准要求。

5．重新验证条件

5.1当更换消毒方法或消毒剂种类后

5.2当作业工艺改变后

5.3当洁净场地装修变动后

6.最终批准

验证报告由本公司验证小组审核签字后正式批准。