一，翻译。（15‘）

1．The aim of biochemistry is to understand life in molecular terms。. 生物化学的目标是弄懂分子水平的生命现象。

2．The major biopolymers included the nucleic acids,the proteins,and the polysaccharides.All are polymers made up of one or more kinds of monomer units. 大分子生物聚合物包括核酸，蛋白质和多聚糖。所有的生物聚合物是由一种或多种单元组成。

3．Most of the unique properties of water are due to its hydrogen bonding potential and its polar nature.水的大多数特性归结于氢的结合电位和它的极性。

4．Many biological molecules are weak acids or weak bases. 许多生物学分子是弱酸或弱碱。

5．The Watson-Crick model for DNA was a two-strand,antiparallel double helix with 10 base pair per turn. Pairing was A-T and G-C. Watson-Crick的DNA模型有两条链，每转有10对碱基的反向平行的双螺旋结构。A与T，G与C分别成对。

6．protein molecules have four levels of structural organization:primary,secondary,tertiary,and quaternary structure.蛋白质分子有4个组织构造上的层次：初级，二级，三级和四级结构

7．the major lipid components of biological membranes are glycerophospholipids, sphingolipids,glycolipids,and glycoglycerolipids.生物膜的脂质组分是磷酸甘油脂类，鞘脂类，糖脂类，甘油糖脂类

8．sugar phosphates are important intermediates in metabolism,tunctioning as activated compounds in syntheses.磷酸化的糖作为合成中有活性的物质，在新陈代谢过程中是重要的代谢中间产物

9．the Michaelis constant,Km , measures the substrate concentration at which the reaction rate is Vmax/2.米氏方程（Km）是当酶反应速率达到最大速率反应速率一半时的底物浓度。

10．ATPis synthesized by three major routes—substrate-level phosphdrylation,oxidative phosphorylation,and photophosphorylation. ATP的合成有3种主要途径：底物水平磷酸化，氧化磷酸化，光合磷酸化

二，名词解释（20‘）

1．酸性氨基酸：如Asp，Glu，Asn，Gln等可以供氢的氨基酸为~。

2．Sanger反应：英国剑桥大学的F。Sanger等人于1977年发明了利用DNA聚合酶的双脱氧链终止原理测定核苷酸序列的方法。由于这种方法要求使用一种单链DNA模板和一种适当的DNA引物，因此有时也称为引物合成法或酶催引物合成法。

3．蛋白质变性与复性: 天然蛋白质分子受到某物理、化学因素，如加热、声、光、压、有机溶液、酸、碱、脲、胍等的影响，生物活性丧失，溶解度下降，物理化学常数发生变化，这种过程称为蛋白质的变性作用。蛋白质的变性作用的实质就是蛋白质分子中次级键的破坏，而引起的天然构象被破坏，使有序的结构变成无序的分子形式。蛋白质的变性作用只是三维构象的改变，而不涉及一级结构的改变。

变性了的蛋白质在一定的条件下可以重建其天然构象，恢复其生物活性，这种现象称为蛋白质的复性。

4．酶的活性中心：：指在一级结构上可能相距甚远，甚至位于不同肽链上的少数几个氨基酸残基或这些残基上的基团通过肽链的盘绕折叠而在三维结构上相互靠近，形成一个能与底物结合并催化其形成产物的位于美蛋白表面的特化的空间区域。对需要辅酶的酶来说，辅酶分子或其上的某一部分结构常是活性中心的组成部分。:

5．氧化磷酸化：在底物被氧化的过程中，（即电子或氢原子在呼吸链中的传递过程中）伴随有ADP磷酸化生成ATP的作用称为氧化磷酸化作用。

6．脂肪酸的β–氧化：指脂肪酸活化为脂酰CoA，脂肪酸CoA进入线粒体基质后，在脂肪酸β–氧化多酶复合体催化下，依次进行脱氢，水化，再脱氢和硫解四步连续反应，释放出一分子乙酰和一分子比原来少两个碳原子的脂酰CoA。由于反应均在脂酰CoA的α–碳原子与β–碳原子之间进行，最后β–碳原子被氧化为酰基，所以称为β–氧化

7．制性内切酶：原核生物细胞内存在的一类核酸内切酶，能在特意顺序部位切断双链DNA，以破坏入侵的噬菌体DNA，其危害。

8．单顺反子：只编码一个蛋白质的mRNA称为~。

9、联合脱氨基作用：指氨基酸与α–酮酸和L–谷氨酸，后者经谷氨酸脱氢酶作用生成游离氨和α–酮戊二酸的过程，是转氨基作用和L–谷氨酸氧化脱氨基作用联合反应。

10．第二信使：在ATP形成cAMP过程中起催化作用的腺苷酸称细胞的第二信使。作用为作为激素和细胞内的中介物质。

三 填空题（一空1分，共25分）

1三羧酸循环中有（4）次脱氢反应，脱下的氢以（NADH）和（FADH2）形式进入呼吸链

2人和动物的必需脂肪酸是（亚油酸）和（α——亚麻酸）

3对紫外区光线有吸收的氨基酸残基是（Phe）（Tyr）（Trp）

4前导链与复制叉移动的方向（相同），连续地沿（3‘-----5’）方向合成新的DNA链，滞后链与复制叉的移动方向（相反），不连续地沿（3‘-----5’）方向合成新链

5在转录后加工中，从最初的转录产物除去的核苷酸序列称（内含子），即存在于最初的转录产物，又存在于成熟的RNA分子中的核苷酸序列称为（外显子）

6   Polyd（A-T）的Tm较Ploy（G-C）Tm值（小）

7 糖原合成的关键酶是（糖原合酶），糖原分解的关键酶是（糖原磷酸化酶）

8 tRNA 的二级结构呈（三叶草）型，三级结构为（L）型

9与酶的高效催化有关的因素主要有：（酸碱催化）（共价催化）（金属离子催化）（多元催化和协同效应）等，

10 PCR技术体外扩增DNA的程序包括DNA变性，（退火）和链的（延伸）三个过程

四  选择题（每题1分，共20 分）

1  下列哪条单链DNA可以与序列为：5‘-TACGATCATAT-3’的DNA链互补？（B）

A  3‘-TACGATCATAT-5’ B  3‘-ATGCTAGTATA-5’

C 3‘-TATACTAGCAT-5’ D  3‘-GCATATACGCG-5’E 3‘-TATACTAGCAT-5’

2  糖酵解过程中最重要的关键酶是（B）

A 已糖激酶   B  6-磷酸果糖激酶  C  丙酮酸激酶   D 果糖双磷酸酶   E 葡萄糖-6-磷酸酶

3能产生乙酰COA的物质是（E）

 A 乙酰乙酰COA  B  酯酰  C  COA –羟-  -甲戊二酸单酰COA  D 柠檬酸   E以上都是

4可以使多肽的α-螺旋中断的氨基酸是（B）

 A  His       B  Pro     C Asp      D Arg    E  Thr

5血红蛋白的辅基是（C）

A血红素A    B 铁原扑琳VI   C 铁原扑琳IX    D铁原扑琳X   E铁原扑琳VIII

6磷酸吡哆醛是下列哪种酶的辅因子（D）

A 脱氢酶   B  转酰基酶      C 脱羧酶   D 转氨酶   E水解酶

7目双连DNA分子中含1000个碱基对，其组成中G+C占58%，则该DNA分子中胸腺嘧啶残基的数目是（B）

A420个    B  210个      C400  个  D 200个   E  280个  

8下列哪种物质不是琥簙酸脱氢酶的竞争性抑制剂（E）

A 乙二酸  B 丙二酸 C 丁二酸     D -酮戊二酸   E 碘乙酸

9肌肉中能量的主要储存型式是下列哪一种？（C）

A  ADP  B 磷酸烯醇式丙酮酸  C  磷酸肌酸 D Camp  E ATP

10与mRNA的AGG密码子相对的反密码子是（D）

    A   UGG  B  TGC   C  GCA  D  CGU  E  CGT 

11分离含有二硫键的肽段可以用（B）

A SDS—PAGE电泳   B对角线电泳  C  琼脂糖电泳  D Weston Blot    E上述都不可以

12丙酮酸脱氢酶复合物中乙酰化酶的辅酶是（A）

A  ATP     B 硫辛酰胺   C  CoASH  D  FAD  E  NAD

13下列哪种蛋白不是结合蛋白（D）

A黏蛋白  B 细胞色素C    C血红蛋白  D 清蛋白    E脱氢酶

14下列属于顺式作用元件的是（A）

   A启动子  B结构基因    C RNA聚合酶   D 转录因子I  E 转录因子II

15尿素循环中，能自由通过线粒体膜的物质是（D）

 A 氨基甲酰磷酸  B 鸟氨酸和瓜氨酸  C精干酸和延胡索酸  D 精胺酸代琥簙酸   E 尿素和鸟氨素

16通过凯式定氮法测定模样品的总蛋白氨为1.5克，则该样品含有的蛋白为（D）

A28.14克   B18.56克   C14.07克  D9.38克   E6.96克

17氰化物 引起的缺氧是由于（D）

A 中枢性肺换气不良     B干扰氧的运输   C微循环障碍 D 细胞呼吸受到抑制     E以上机制都不是

18真核生物含有DNA聚合酶 αβγδ       和ε，其中DNA聚合酶δ主要负责的是（E）

  A DNA的聚合    B引物合成  C参与修复  D 解开双螺旋  E 以上作用都不是

19 用于氨基酸序列仪测定氨基酸序列所用的主要试剂是（D）

A  DNS   B   DNFB C   DMSO D  PITC   E 氨基酸

20若酶促反应的速度v+Vmax*90%,则[s]应为Km的倍数是（B）

A4.5   B 9.0  C 8.0   D  5.0   E 90  

五．简答：（40‘）

1．已知下列氨基酸的等电点：甘氨酸(PI=5.97)天冬氨酸(PI=2.98)赖氨酸(PI=9.74)组氨酸(PI=7.59)请列表说明PH=1.0,PH=2.1,PH=4.0,以及PH=10时上述氨基酸所带的静电荷（用+，-或0表示）。

答：原理：SDS是一种阴离子去污剂，在溶液中能与蛋白质分子的疏水部分定量结合，把大多数蛋白质拆成亚单位，并带上阴离子。SDS--聚丙烯酰胺电泳消除了电荷效应，只有分子筛效应，故蛋白质电泳迁移率完全取决于分子量，迁移率与分子量对数呈线性关系。方法：（1）制胶板（2）加样（3）电泳（4）染色观察。应用：测蛋白质分子量

3．假定果糖由己糖激酶磷酸化，写出肝脏内D-果糖转变为乳酸的各步反应方程式，各步反应所需要的酶以及总方程式

答：D—果糖              果糖—6—磷酸              果糖—1，6—二磷酸         

            ATP （1）ADP             ATP （2）ADP                    （3）

二羟丙酮磷酸         1，3—二磷酸甘油酸             3—磷酸甘油酸         

             Pi （4）                  ADP（5）ATP               （6）

2—磷酸甘油酸           磷酸烯醇式丙酮酸              烯醇式丙酮酸          

               （7）H2O                 2ATP（8）2ADP

丙酮酸        乳酸

+2H+（9）

（1）己糖激酶（2）磷酸果糖激酶（3）醛缩酶（4）磷酸甘油醛脱氢酶（5）磷酸甘油酸激酶（6）磷酸甘油酸变位酶（7）烯醇化酶（8）丙酮酸激酶（9）乳酸脱氢酶

4．简述原核细胞蛋白质的合成过程。

答：（1）起始：需起始因子，GTP。（2）肽链延长：进位，转肽，脱落，移位四步重复进行。进位需延长因子EFTu和EFTs，GTP，Mg2+；转肽需转肽酶，Mg2+和K+；移位需延长因子EFG，GTP和Mg2+（3）终止阶段：需终止因子RF1，RF2，RF3。方向：从N端到C端

5．简述说明胞质中NADH所携带的氢被其他物质带入线粒体内的两种穿梭机制

答：（1）甘油——3——磷酸穿梭途径：二羟丙酮磷酸——（2）苹果酸——天冬氨酸穿梭机制

6．比较DNA和RNA生物合成的异同

答：主要从以下几方面总结（1）生成方式。像DNA复制，DNA修复合成，反向转录合成DNA，转录生成RNA，RNA复制等（2）所需酶不同（3）是否需要引物（4）底物不同（5）DNA不需修饰但在末端有端粒，RNA需修饰。

7．简述蛋白质功能的多样性

答：1，催化2，调节3，运转4，贮存5，运动6，结构成分7，支架作用8防御作用9异常功能

8．简述Southern，Northern及Western杂交技术的原理及应用。

答：Southern原理：根据毛细管作用的原理，使在电泳凝胶中分离的DNA片断转移并结合在适当的滤膜上，然后通过同标记的单链DNA或RNA探针的杂交作用检测这些被转移的DNA片段，这种实验方法叫做Southern杂交。应用：可以找出DNA分子中基因编码区的大小和位置。Northern原理：将电泳凝胶中的RNA转移到叠氮化的或其他化学修饰的活性滤纸上，通过共价交联作用而使它们永久的结合在一起。应用：用于RNA的检测。Western原理：将蛋白质从电泳凝胶中转移并结合到纤维素滤膜上，然后同放射同位素125I标记的特定蛋白质之抗体进行反应。应用：检测蛋白质。

六，论述题：（30‘）

1．试论人类基因组计划的内容及其对人类社会的重要意义。

内容：（三版P611）

1986年，Dulbecco R率先提出“人类基因组计划”；美国决定用15年时间（1990~2005）出资30亿美元完成这一计划，美、英、日、中、德、法六国参与，目前测序已基本完成，核对了4~5次。目前还需核对，将基因组序列准确率提高到99..99%.预计将于2003全部完成.

意义:① 、带动有关技术的突破和发展，并建立几十个“模式动物”基因组和代表性物种的基因组。

②、鼓励了科学家们进一步规划后基因组时代的研究任务，由此提出了功能基因组的研究方案。

2．试总结对蛋白质进行分离及纯化的相关技术。

（一）根据分子大小不同的纯化方法

1．透析何超过滤

2．密度梯度离心

3．凝胶过滤

（二）利用溶解度差别的纯化方法

1．等电电沉淀和PH控制

2．蛋白质的盐溶和盐析

3．有机溶剂分级分离法

4．温度对蛋白质溶解度的影响

（三）根据电荷不同的纯化方法

1．电泳

2．聚丙烯酰胺凝胶电泳

3．毛细管电泳

4．等电聚焦

5．层析聚焦

6．离子交换层析

（四）利用选择性吸附的纯化方法

1．羟磷灰石层析

2．疏水作用层析

（五）利用对配体的特异生物学亲和力的纯化方法

（六）高效液相层析和快速蛋白质液相层析下载本文