[满分90分，限时45分钟]

一、选择题(每小题6分，共36分，每小题只有一个选项符合题意)

1．做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是

A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖

B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上

C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落

D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上

解析　A项，在高压灭菌的操作过程中，加热结束后应让灭菌锅内温度自然下降，待压力表的压力降到零时，打开放气阀，旋松螺栓，打开盖子。B项，倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，而不是完全取下放到一边。C项，接种环经火焰灼烧灭菌后应在火焰旁冷却后，再用其挑取菌落。D项，在微生物的培养中，一般将培养皿倒置，在皿底上用记号笔做标记。

答案　D

2．(2016·南京一模)下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法错误的是

A．①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行

B．步骤①中待倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖

C．步骤③中，每次划线前后都需对接种环进行灼烧处理

D．划线接种结束后，将图④平板倒置后放入培养箱中培养

解析　步骤一为倒平板操作，为减少培养基感染杂菌的机会，倒完后立即盖上培养皿盖。

答案　B

3．下列有关生物技术实践相关实验的叙述，正确的是

A．制作果酒的温度一般要略高于果醋的制作温度

B．制作固定化酵母细胞实验中，需将凝胶珠置于CaCl2溶液中处理适宜的时间

C．制作固定化酶的最佳方法是采用海藻酸钠溶液进行包埋固定

D．腐乳制作的全过程都离不开以毛霉为主的微生物发挥作用

解析　制作果酒的温度一般控制在18—25 ℃左右，而制作果醋的温度一般控制在30—35 ℃左右，A项错误。酶更适合采用化学结合和物理吸附法固定化，而细胞多采用包埋法固定，C项错误。腐乳的制作流程图为：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制，只有第一个阶段离不开以毛霉为主的微生物的发酵作用，其它三个阶段需要抑菌和灭菌，D项错误。

答案　B

4．(2016·苏州检测)下图表示利用苹果制备果酒、果醋的流程图。下列有关叙述错误的是

A．过程①接种人工培育的酵母菌可以提高苹果酒的品质

B．苹果原醋可以为过程③提供所需菌种

C．过程①所需的最适温度低于过程②

D．整个发酵过程都必须在严格无菌条件下才能正常进行

解析　果酒和果醋都离不开微生物的发酵作用，前者需要酵母菌的发酵作用，后者需要醋酸菌的发酵作用，整个发酵过程应消除杂菌污染，但不可能无菌发酵，D项错误。

答案　D

5．下列有关微生物培养与应用的说法，正确的是

A．天然培养基是指直接取自然界不需加工的培养基

B．接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理

C．大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段

D．分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源

解析　天然培养基是指用天然物质制成的培养基，但也需要加工；实验操作者的双手应消毒，不能灭菌；分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源，不是碳源，需加入不含氮元素的有机物(如葡萄糖)作为碳源。

答案　C

6．图1是玫瑰精油的提取装置，图2为提取的胡萝卜素粗品通过纸层析进行鉴定结果示意图，下列叙述错误的是

A．图1中数字①②③分别代表温度计、出水口、进水口

B．图1的方法为水蒸气蒸馏法，蒸馏时收集的蒸馏液不是纯的玫瑰精油

C．图2所示的鉴定方法的基线一般距底边3 cm，B、D为标准样点

D．图2中甲代表的物质是胡萝卜素层析带，乙代表的物质是其它色素和杂质

解析　分析题图1可知，①是温度计，用来测定馏分的温度，冷凝管的上端②是出水口，下端③是进水口，这种方法叫水蒸气蒸馏法，此法锥形瓶中收集到的液体不是纯的玫瑰精油而是玫瑰油和水的混合物，A、B正确；图2所示的鉴定方法的基线一般距底边2 cm，图中A、D是标准样品的样点，B、C是提取的粗品胡萝卜素样点，C错误；图2中甲代表的物质是胡萝卜素层析带；乙代表的物质是其它色素和杂质，D正确。

答案　C

二、非选择题(共54分)

7．(14分)(2016·课标全国卷Ⅰ)空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下：

① 配制培养基(成分：牛肉膏、蛋白胨、 NaCl、X、H2O)；

② 制作无菌平板；

③ 设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；

④ 将各组平板置于37 ℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。

回答下列问题：

(1)该培养基中微生物所需的氮来源于__________。若要完成步骤②，该培养基中的成分X通常是__________。

(2)步骤③中，实验组的操作是__________。

(3)若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了__________现象。若将30(即36－6)个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法__________(填“正确”或“不正确”)。

解析　(1) 牛肉膏和蛋白胨都含有蛋白质的水解产物，都可以作为氮源；平板为固体培养基，故需要加入琼脂。(2) 实验探究的是教室内不同高度空气中微生物的分布，其中变量为不同高度，故需在不同高度下放置开盖平板。同时，为了保证单一变量，需要保证开盖放置时间一致。为了保证实验可靠，需要设置多个平行试验组。(3) 在完全正确的操作情况下，空白对照组中不应出现菌落。若出现菌落，说明操作过程中存在微生物污染，属于实验失误，所有实验数据均不应采用。

答案　(1)牛肉膏和蛋白胨　琼脂

(2)将平板开盖在不同高度下放置适当且相同时间，每组均设置相同个数的多个平板

(3)(微生物)污染　不正确

8．(16分)(2016·课标全国卷Ⅱ)苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的，回答下列为题：

Ｋ

(1)酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，在酵母菌细胞的__________中进行，其产物乙醇与__________试剂反应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇的检验；过程③在酵母菌细胞的__________中进行，与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增殖速度__________。

(2)第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，根据醋酸杆菌的呼吸作用类型，该过程需要在__________条件下才能完成。

(3)在生产过程中，第一阶段和第二阶段的发酵温度不同，第一阶段的温度__________(填“低于”或“高于”)第二阶段。

(4)醋酸杆菌属于__________核生物，其细胞结构中__________(填“含有”或“不含有”)线粒体。

解析　(1)图示中的过程①和②分别表示无氧呼吸的第一、第二阶段，其场所均为细胞质基质；橙色的重铬酸甲溶液，在酸性条件下与乙醇(酒精)发生化学反应，变成灰绿色。过程③表示有氧呼吸的第二、第三阶段，其场所分别为线粒体基质和线粒体内膜，即在酵母菌细胞的线粒体中进行。与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增殖速度快。(2)醋酸杆菌是一种好氧菌，在氧气充足的条件下才能进行旺盛的生命活动，因此将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，需要在有氧条件下才能完成。(3)第一阶段即果酒的制作，所控制的温度范围是18～25 ℃，第二阶段即果醋的制作所控制的温度范围是30～35 ℃，所以第一阶段的温度低于第二阶段的。(4)醋酸杆菌属于原核生物，其细胞结构中不含线粒体等复杂的细胞器。

答案　(1)细胞质基质　重铬酸甲　线粒体　快

(2)有氧　(3)低于　(4)原　不含有

9．(12分)(2016·课标全国卷Ⅲ)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸菌能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题：

(1)分离纯化乳酸菌时，首先需要用__________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是__________。

(2)推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有__________________和__________________。分离纯化时应挑选出__________的菌落作为候选菌。

(3)乳酸菌在－20 ℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的__________(填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”)。

解析　(1)分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释；进行梯度稀释的理由是在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。(2)在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸和利于乳酸菌的识别和分离；分离纯化时应挑选出在平板上有溶钙圈的菌落作为候选菌。(3)乳酸菌在－20 ℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的甘油。

答案　(1)无菌水　在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落

(2)中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸　利于乳酸菌的识别和分离　在平板上有溶钙圈

(3)甘油

10．(12分)(2015·课标全国卷Ⅱ)回答与胡萝卜素有关的问题：

(1)胡萝卜含有的胡萝卜素中，最主要的是__________(填“α­胡萝卜素”、“β­胡萝卜素”或“γ­胡萝卜素”)，该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子__________，后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症，该疾病称为________，胡萝卜素是__________(填“挥发性”或“非挥发性”)物质。

(2)工业生产上，用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时，__________(填“需要”或“不需要”)将新鲜的岩藻干燥。

(3)现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂，应选用其中的______________作为胡萝卜素的萃取剂，不选用另外一种的理由是_______________________________。

解析　(1)胡萝卜含有的胡萝卜素有三类，其中最主要的是β­胡萝卜素，β­胡萝卜素在人体内可以转变成维生素A，维生素A缺乏会导致夜盲症。胡萝卜素是非挥发性物质。(2)胡萝卜素的提取一般采用萃取法，萃取前需要对材料进行干燥处理，以提高萃取的效率。(3)萃取胡萝卜素的有机溶剂应该具有很高的沸点，能够充分溶解胡萝卜素，并且不与水混溶，如乙酸乙酯。乙醇是水溶性有机溶剂，因萃取过程中能与水混溶而影响萃取效果，所以不用它作萃取剂。

答案　(1)β­胡萝卜素　维生素A　夜盲症　非挥发性

(2)需要

(3)乙酸乙酯　萃取胡萝卜素的有机溶剂应不与水混溶，而乙醇为水溶性有机溶剂(其他合理答案也可)下载本文