一、目的：通过本次试验进一步认识无菌操作的重要性；掌握试管斜面菌种的接种方法。
二、原理：微生物接种的目的在于获得生长正常的纯培养，必须防止杂菌污染。只有在培养基、实验器皿等处于无菌的前提下，在无菌条件下接种，严格地无菌操作，才能保证菌种不被污染。
三、器材：菌种、培养基、接种工具、培养箱等。
四、试验步骤：
斜面接种：由已长好微生物的斜面中挑取少量菌种接种至另一空白斜面培养基上。
1．准备
（1）贴标签 距试管口2~ 3cm位置上，注明菌名、接种者、接种日期等。
（2）点燃酒精灯
2．接种
(1)手持试管
(2)旋松棉塞
(3)取接种环并灭菌
(4)拔棉塞
(5)接种环冷却
(6)取菌种
(7)接种
(8)塞棉塞
(9)接种环灭菌
(10)紧塞
（具体操作方法附后）
3、接种后的培养
（1）接种后放适宜条件下培养，培养温度细菌一般为30～35℃，真菌一般为23～28℃。
（2）培养过程中要随时检查，及时检出污染试管。
五、注意事项
1、严格按要求无菌操作。
2、操作迅速、准确，不划破培养基。
附：斜面接种的具体操作方法：
将菌种斜面培养基(简称菌种管)与待接种的新鲜斜面培养基(简称接种管)持在左手拇指、食指、中指及无名指之间，菌种管在前，接种管在后，斜面向上管口对齐，应斜持试管呈约45度角，并能清楚地看到两个试管的斜面。
以右手在火焰旁转动两管的棉塞，使其松动，以便接种时易于拔出。
右手与拿笔同样持接种环柄，将接种环放在火焰上灼烧。镍铬丝部分（环和丝）必须烧红，以达到灭菌目的，然后将除手柄部分的金属杆全用火焰灼烧一遍，尤其是接镍铬丝的螺口部分，要彻底灼烧以免灭菌不彻底。
用右手的小指和手掌之间及无名指和小指之间拨出试管棉塞，将试管口在火焰上通过，以杀灭可能沾污的微生物。棉塞应始终夹在手中。
将灼烧灭菌的接种环插入菌种管内，先接触无菌苔生长的培养基或试管壁，待冷却后从斜面上刮取少许菌苔取出，接种环，应在火焰旁迅速插入接种管（不能通过火焰）。在试管中由下往上做S形划线。
接种完毕，接种环应通过火焰抽出管口，烧试管口一圈并迅速塞上棉塞。将接种环再重新仔细灼烧后放回原处，塞紧棉塞。下载本文
